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Phosphatase alcaline dans plasmide


Antoinee
Go to solution Solved by ClaraF,

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  • Ancien Responsable Matière

Salut ! J'ai pas bien compris pourquoi après ouverture d'un plasmide on devait parfois (pas tjrs si j'ai bien saisi) faire agir la PA pour sortir les grp P des extrémités ??,

 

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  • Solution

Coucou!

En gros, si on n’enlève pas les phosphates des extrémités, les brins qu'on vient de couper vont très rapidement se re-assembler. Donc si on les enlève avec la PA, le plasmide restera ouvert pour pouvoir ajouter ce qu'on veut. Sauf qu'après il faudra pour bien lier le plasmide avec le nouveau brin (qui ne sera attaché que par une extrémité de chaque brin, leur extrémité 5'- (P)) avec de l'ADN ligase.   

 

Voilà, j’espère que se soit plus clair. Si non, n’hésites pas 🙂 

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