Mathias_czk Posted December 14, 2019 Share Posted December 14, 2019 Coucou, Alors voila, j'ai bien compris la méthode de Sanger, l'histoire des 4 tubes, et tout mais il y a un détail que je ne comprend pas ^^ En fait, on dit que l'on met des ddXTP dans les tubes ( peut importe si c'est A,C,G,T ). Mais je ne comprends pas pourquoi l'ADN polymérase s'arrête toujours dans l'ordre... Je m'explique, prenons les ddTTP et la séquence 5' ATTGCGTATCATGGGCC 3' Du coup, on met tout les constituants nécessaires dans le tube en présence de cet ADN, et l'ADN polymérase va forcément s'arrêter au premier A quel rencontre ? Ou bien le fait que dans le tube il y a aussi des dTTP ( donc un "d" avant "TTP" et pas deux ) et puis çà va être le hasard qui va faire que bim, a tel moment l'ADN polymérase utilise un ddTTP au lieu d'un dTTP et donc va bloqué la séquence. Si c'est le cas, çà veut dire que par exemple le premier brin synthétisé peut être : 5' TAACGCATAGT 3', puis un autre : 5' TAACGCAT 3' etc... J'espère avoir était clair x) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Luciole Posted December 14, 2019 Solution Share Posted December 14, 2019 Oui c’est ça , elle utilise un ddXTP au hasard lors du sequencage, donc au final on se retrouve avec les plus petits brins en bas avec le ddXTP utilisé très tôt lors du sequencage , et les plus longs brins en haut avec les ddXTP utilisé pour les derniers nucleotides. Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Mathias_czk Posted December 14, 2019 Author Share Posted December 14, 2019 Haaaa ok beh nickel alors Merci pour la confirmation @Luciole x) Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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