DrR Posted November 25, 2019 Share Posted November 25, 2019 (edited) salut dans la nick translation, on marque la sonde après l'avoir synthétisée ? ou c'est après la dénaturation des 2 brins (le marqué et le non marqué) qu'on prend le brin marqué et qu'on utilise comme sonde ? est ce que la nucélase S1 coupe le cdna ou seulement arn et adn génomique ? pourquoi dans la phase d'élongation de la PCR on travaille à haute température ? normalement la haute température j'ai compris que ça dénaturait les brins donc vu qu'on veux hybrider pourquoi on chauffe ? tjs e nPCR je comprends pas pourquoi on a des extrémités fixes et d'autres variables merci Edited November 25, 2019 by DrR Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Solution Moumou Posted November 26, 2019 Ancien Responsable Matière Solution Share Posted November 26, 2019 Salut @DrR, alors voilà ce que j'ai noté dans mon cours : Translation de coupure : Coupure de l’ADN qui se déplace dans le sens 5’ 3’ Avant d’intégrer le nucléotide marqué, on doit couper l’ADN (formation d’un trou pour qu’un nt s’incorpore) Utilisation de 2 enzymes : La DNAse I à faible concentration pour couper un seul brin Une polymérase (synthèse de nt) Étapes : Coupure du brin par la DNAse (on dégage le premier nt) Utilisation de la DNA Pol I Ajout d’un mélange de dNTP contenant 1 nt qui sera marqué (ici le dATP) La DNA Pol va incorporer des nt là où on a fait des trous mais elle va aussi grignoter le brin dans lequel s’incorpore les nt Intégration des dATP radioactifs au fur et à mesure que la DNApol avance Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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