cactushérisson Posted November 17, 2019 Share Posted November 17, 2019 (edited) Bonsoiiir ! J'ai des questions à propos de ces items : "Après blanchiment d'une zone de la membrane cellulaire, la fluorescence ne réapparaîtra que si de nouvelles protéines-GFP sont synthétisées." Compté FAUX "Les modifications conformationnelles étudiées en FRET nécessite seulement l'utilisation de la GFP et d'un de ses variants ou de deux variants de la GFP différents" egalement FAUX "On peut prouver que 2 molécules interagissent dans une cellule en montrant leur colocalisation avec des anticorps marqués par des fluorochromes différents". FAUX Est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer les raisons ? Merci d'avance ! Edited November 17, 2019 by cactushérisson Oublie d'éléments Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Solution Carlarusso Posted November 20, 2019 Ancien Responsable Matière Solution Share Posted November 20, 2019 Coucou @cactushérisson, je vais essayer de t'expliquer ces items : Le 17/11/2019 à 18:56, cactushérisson a dit : Les modifications conformationnelles étudiées en FRET nécessite seulement l'utilisation de la GFP et d'un de ses variants ou de deux variants de la GFP différents Si tu reprend ton poly sur les technique tu verras que par exemple l'étude du changement de conformation en fret est effectivement et également permise par un laser qui éclaire l'échantillon a la longueur d'onde d'excitation du donneur. Ce donneur émet un rayonnement qui correspond a la longueur d'onde d'excitation du second fluorochrome. Si ils sont assez proches il peut y avoir tranfsfert d'énergie entre donneur et accepteur, ainsi on peut savoir facilement si par exemple une protéine est dépliée ou pas ! Le seulement est ici faux ! Le 17/11/2019 à 18:56, cactushérisson a dit : On peut prouver que 2 molécules interagissent dans une cellule en montrant leur colocalisation avec des anticorps marqués par des fluorochromes différents On ne peut pas prouver à tous les coup que 2 molécules interagissent en montrant qu'elles colocalisent. Le fait qu'elles colocalisent veut dire qu'elles sont relativement proches. Par contre tu peux montrer une interaction avec la technique de FRET Le 17/11/2019 à 18:56, cactushérisson a dit : Après blanchiment d'une zone de la membrane cellulaire, la fluorescence ne réapparaîtra que si de nouvelles protéines-GFP sont synthétisées Si tu regardes dans ta technique de FRAP, après blanchiment la fluorescence peut réapparaître par plusieurs procédés. Le que montrant l'exclusivité se montre faux en effet : on peut en effet avoir renouvellement de molécules avec synthèse de nouvelles molécules mais également une diffusion latérale dans la membrane de molécules qui viennent localement sur le blanchiment bonne journée a toi La tutobise Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
cactushérisson Posted November 24, 2019 Author Share Posted November 24, 2019 @Carlarusso Merci beaucoup pour tes réponses !! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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