Invalidation

[Guest Invalidation]

Bonjour, je n’arrive pas à comprendre l’invalidation conditionnelle, quelqu’un pourrait il m’expliquer ? 
merci davan

[DaleCooper]

Salut ! L'invalidation conditionnelle, c'est ce qui va te permettre d'avoir un contrôle spatio-temporel de l'invalidation d'un gène : on pourra l'invalider quand on veut et dans le type cellulaire que l'on veut. Pour cela on prend 2 lignées de souris:

 

La première a subi une transgenèse de recombinaison et elle présente 2 allèles recombinants floxés (c'est-à-dire possédant un site LoxP). Un site LoxP c'est une courte séance dADN, avec aux extrémités des nucléotides palindromiques, et qui est normalement absente des eucaryotes. 

Pour la deuxième lignée de souris, on lui a rajouté un gène Cre par transgenèse additive, le transgène Cre étant sous contrôle d'un promoteur spécifique d'un type cellulaire et étant inductible. Cre c'est une recombinase qui va catalyser la recombinaison entre deux sites LoxP (et donc invalider la séquence entre ces deux sites).

 

On fait un croisement de ces deux lignées de souris, et on a donc une nouvelle lignée de souris double transgénique avec 2 allèles modifiés, avec une expression ciblée de Cre uniquement où son promoteur fonctionne : on a le contrôle spatial. 

J'ai dit plus tôt que le gène Cre rajouté est inductible : cela veut dire qu'on peut l'activer quand on veut. Grâce à ça, on peut contrôler le moment où on déclenche la recombinaison, la recombinase est inactive jusqu'au moment du traitement par exemple ! C'est le contrôle temporel.

 

Pour résumer, on va pouvoir invalider un gène dans le type cellulaire que l'on veut (grâce au promoteur spécifique), au moment où on le voudra (Cre est inductible). On utilise cette technique aussi pour connaître le rôle d'une protéine dans un type cellulaire particulier. 

 

Voilà, j'espère que c'est clair !

Edited November 17, 2019 by DaleCooper

[Guest Invalidation]

Oui merci beaucoup d’avoir pris le temps !!