RidaMns Posted November 8, 2019 Share Posted November 8, 2019 Bonsoir, Quelqu'un aurai une explication ou une fiche explicatif de la méthode de Sanger svp !!!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution Mathou09 Posted November 9, 2019 Solution Share Posted November 9, 2019 Salut ! Alors pour la méthode Sanger : En premier on fait une dénaturation du brin ADN puis on utilise l'ADN-POL 1 avec des dNTP et des ddNTP. Les dNTP sont marqués radioactivement et les ddNTP sont fluorescents. Les ddNTP arrête obligatoirement l'élongation du brin (car desoxy en 3' sur le ribose). Tout ça se passe dans une machine avec une caméra qui va recapter la lumière émis par le fluorofore après son excitation. Et pour faire la différence entre les bases les fluorofores émettent des couleurs différentes selon le type de base (par exemple À en vert, G en noir,...). Donc en gros sur ton résultat final tu vas avoir un pic de couleur selon le ddNTP qui a été intégré dans ton brin. Mais faut pas oublier que tu es donc en sens inverse par rapport à ton ADNc (regarde la diapo 126) donc si tu as un pic avec C la base de ton ADNc est G. Aussi la hauteur des pics ne veut rien dire à contrarié du pyrosequencage. Voilà ça c'est l'explication en gros, je sais pas si c'est vraiment très clair mais si jamais n'hésite pas à poser d'autres questions plus spécifiques dessus j'essaierais de répondre ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
RidaMns Posted November 9, 2019 Author Share Posted November 9, 2019 Magnifique, merci beaucoup c'est beaucoup plus claire. Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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