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technique de retardement sur gel


boum
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salut ! est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer en détail cette diapo svp ? j'ai rien compris à part le fait que c'est une technique qui permet de mettre en évidence les interactions entre une protéine et l’ADN. mais le mécanisme, les + et les -... tout ça j'ai pas compris2113962998_Capturedcran2019-09-2107_50_31.png.f3640a75fa5b9c8b1c426aba504f8769.png

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  • Solution

Alors en gros t'as fais ton retardement sur gel, tu sais que ta protéine d'intérêt se lie avec ton adn et tu te demandes c'est quel protéine d'intérêt?

pour la définir il faut avoir une idée de ce qu'elle est, donc imaginons tu sais pas trop t'hésites entre 5 protéines

tu vas prendre 5 AC dirigés contre ces 5 protéines différentes, et tu vas les faire migrer en retardement sur gel,

si t'observes un retard sur le gel ( comme dans le dernier puit) ca veut dire que l'AC se lie avec la protéine, et si y'a pas de gel c'est que l'AC ne se lie pas avec la protéine,

du coup cela te permet de caractériser ta protéine d'intérêt ( mais pour cela il faut d'abord avoir une idée de la protéine que c'est, psk évidemment tu vas pas faire 150 migrations avec 150AC dirigés contre 150 protéines différentes en espérant que tu trouves la bonne au bout de la 150eme migration)

c'est +clair?

Edited by maestro
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non! c'est pour trouver quel genre de protéine tu as utilisé ( au passé pas au futur, c'est la dernière étape)

 

t'as une protéine d'intérêt X, on joue au qui est-ce, on veut savoir elle fait quoi cette prot

Est-ce qu'elle se lie à mon adn? rép au puit 2

Est-ce qu'elle se lie à mon adn de manière spé ou aspécifique? puit 3 et 4

Est-ce que ma protéine est la protéine sur laquelle j'ai un doute? puit 5

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