Question technique immuno.

[Sphénok]

Bonsoir,

 

L'item D de ce QCM me pose problème (poly de Pâques 2017) :

 

QCM 5 – Soit la protéine pathologique PeBu impliquée dans le pemphigus bulleux de 130kDa dont on
dispose d'une version purifiée. On sait que cette protéine apparaît suite à une mutation. On dispose
d'un extrait protéique de l'épiderme pathologique d'un patient. On produit 6 anticorps monoclonaux
spécifiques de PeBu par les méthodes habituelles. On réalise ensuite une immunoprécipitation à partir
de ces AC et de l'extrait protéique épidermique :
Tous les AC détectent une protéine de 130 kDa. AC 2,5 et 6 détectent en plus une protéine de 30 kDa.
Enfin AC 6 détecte une protéine de 100 kDa :

D. AC 5 et 6 pourraient permettre de détecter avec certitude PeBu dans un extrait protéique par
immunoprécipitation suivi d'une électrophorèse PAGE-SDS. (VRAI)
 

J'aurais mis faux cet item étant donné que l'on ne sait pas s'il s'agit d'un épitope conformationnel ou séquentiel. Du coup s'il sait d'un conformationnel, il sera dénaturé avec le PAGE-SDS donc on ne peut pas affirmer avec certitude que l'on pourra détecter PeBu ?

 

Ou alors l'IP suivie d'un PAGE-SDS n'est pas dénaturante ? 

 

Merci !

[Theomérase]

Salut @Sphénok !

Quand tu fais une IP suivi d'un PAGE-SDS, la reconnaissance de l'antigène par l'anticorps se fait lors de L'IP en condition non denaturante tu peux donc reconnaître les 2 types d'epitope. Quand tu réalises par la suite le SDS-Page, l'ac est déjà fixé à L'Ag et ne va pas se détacher, on pourra donc reconnaître PeBu ainsi que donner son PM peu importe le type d'epitope qu'il porte

[Sphénok]

D‘accord, merciiiiiiii