POLY ENTRAINEMENT

[missiman]

salut

j'arrive pas a résoudre cet item si qql pourrait m'aider merci! bonnes réponses sont ABD

[NicoLqe]

Salut !

 

On te dit dans l'énoncé que la séquence génique est sous contrôle d'un promoteur qui répond à la présence de glucocorticoïdes. En l'occurence tu as la Dexaméthasone. Tu vas tester la production et la localisation de la protéine en fonction de la présence de dexaméthasone : si y'en a pas (western blot de gauche) tu n'as pas de protéine, ce qui est logique car ton promoteur n'est pas activé puisqu'il n'y a pas de glucocorticoïdes.

Si y'en a (western de droite) : lorsque la protéine est recherchée dans le surnageant, tu as une bande plus épaisse que lorsqu'elle est recherchée dans les cellules directement. Cela signifie que la protéine a tendance à quitter la cellule : en d'autres termes, elle est sécrétée dans le surnageant.

 

Donc :

A. Vrai, c'est ce que je t'explique juste avant.

B. Vrai, puisque lorsque tu mets la dexaméthasone, tu as une production de protéines.

C. Je n'ai pas l'énoncé précédent pour dire si y'a augmentation de masse moléculaire par rapport à la production par les bactéries mais, de souvenir, c'est le cas. La justification n'est pas la dimérisation mais le fait qu'on soit dans un système eucaryote ici. La protéine (avant d'être sécrétée) va subir un certain nombre de modification co ou post traductionnelle (glycosylations,...) #biocell. Du coup ce sont ces modifs qui sont responsables de l'augmentation de masse moléculaire par rapport à la protéine produite par les bactéries.

D. Vrai du coup ^^

E. Nope. Il faudrait avoir une chromatographie de gel-filtration nous donnant le poids de la protéine non dénaturée. A ce moment là on pourrait comparer le poids  obtenu en gel filtration avec celui obtenu en western blot pour voir si c'est le même (à ce moment la ce serai faux) ou pas (à ce moment là ça serait vrai parce que cela voudrait dire que la prot est un homodimère/trimère/tétramère....).

 

Voilà, n'hésite pas si y'a encore un souci