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elispot


Soleneuh
Go to solution Solved by Lilette,

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  • Ancien Responsable Matière

Coucou !

concernant un item du td sur biotechnologies immunologiques,

"les plasmocytes sécréteurs d'Ac présents dans cette population de cellules peuvent être numérés par elispot" VRAI

Pourtant je pensais que elispot justement permettait de quantiifier les Ac produits par les plasmocytes, et non les plasmocytes eux-mêmes...

qu'est ce que j'ai mal compris ?

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  • Solution

Hello!

C'est bien ça l'élispot permet de détecter et de numérer des plasmocytes sécréteurs d'un anticorps spécifique:

- le fond du puit est recouvert d'antigène

- on ajoute les plasmocytes sécréteurs → les anticorps vont se fixer à l'antigène

- on rince

- on ajoute des anticorps anti-espèce couplés à une protéine qui produit un produit insoluble

 

Ensuite on compte les spots créés par l'enzyme et on connait le nombre de plasmocytes sécréteurs.

 

Voilà ?

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Salut @solenefdo,

L'Elispot n'est pas à proprement parler une technique quantitative, elle a vraiment pour vocation de numérer les plasmocytes sécréteurs d'Ac; Je te rappelle juste le principe:

Tu recouvres une plaque d'Ag d'intérêt, ensuite tu disposes tes cellules, tu attends un peu, tu laves, puis tu révèles avec un Ac secondaire couplé à une peroxydase, donc là où tu as des tâches colorées, tu sais qu'il y avait des cellules sécrétrices. Tu n'as donc qu'à compter les tâches pour numérer les cellules sécrétrices d'Ac! Mais ça ne te permet pas trop de dire quelle quantité d'Ac a été sécrétée.

 

Bonne journée!

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  • Ancien Responsable Matière

@Lilette, @jpmeao, @aymericz merci beaucoup pour vos réponses :) 

du coup à chaque fois que l'on va avoir un "cercle de réaction", un spot, qui a été révélé avec l'Ac secondaire anti Ac (qui lui a reconnu l'Ag fixé), à chaque fois que l'on voit un de ces spots, c'est qu'un plasmocyte a fabriqué des Ac

ooook merci beaucoup j'avais pas du tout compris ça !! nickel maintenant merci :) 

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