LauLAbricot Posted February 24, 2019 Share Posted February 24, 2019 Bonsoir ! En ce qui concerne la méthode multicouche, Dr Nogueira a dit que celle-ci était très utile lorsqu'on avait 50 dosages à faire par exemple, mais concrètement je ne vois pas en quoi cela l'est plus que la méthode directe... D'ailleurs je ne vois pas ce que celle-ci apporte de plus, si ce n'est une amplification du signal, par rapport à la méthode directe. Autre question : au niveau du système peroxydase/anti-peroxydase, quel élément porte le signal ? La peroxydase logée dans le complexe PAP ? Merci d'avance ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
NicoLqe Posted February 25, 2019 Share Posted February 25, 2019 Salut ! Alors ta première question je ne peux pas y répondre parce que je ne vois pas non plus... Après retient simplement que ça permet d'amplifier le signal, c'est amplement suffisant pour les qcms à ce niveau là Pour le système peroxydase/anti-peroxydase : Ne te tracasse pas trop non plus pour ça. En fait tu as une enzyme couplée à ton anticorps (voir schéma du poly), tu vas rajouter le substrat de ton enzyme dans le milieu, et tu visualiseras ensuite les endroits où ton substrat a été utilisé, donc oui le signal c'est en quelques sortes l'enzyme. Je le vois comme ça en tout cas ^^ Voilà, bonne journée Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution aymericz Posted February 25, 2019 Solution Share Posted February 25, 2019 Salut @LaurineL, Il y a 13 heures, LaurineL a dit : En ce qui concerne la méthode multicouche, Dr Nogueira a dit que celle-ci était très utile lorsqu'on avait 50 dosages à faire par exemple, mais concrètement je ne vois pas en quoi cela l'est plus que la méthode directe... D'ailleurs je ne vois pas ce que celle-ci apporte de plus, si ce n'est une amplification du signal, par rapport à la méthode directe. Quand tu as des dosages de plusieurs protéines différentes à faire c'est plus facile et moins cher de produire des Ac monoclonaux contre tes protéines et produire des Ac secondaires anti-Ac que tu couples à une molécule signal que de produire des anticorps monoclonaux contre tes protéines d'intérêt, que tu devras chacun coupler à une molécule signal dns le cadre de la méthode directe! Si tu as 4 dosages ça te fait économiser 3 couplages! Est-ce que c'est clair ? Il y a 13 heures, LaurineL a dit : au niveau du système peroxydase/anti-peroxydase, quel élément porte le signal ? La peroxydase logée dans le complexe PAP ? C'est bien sur l'enzyme qui est à l'origine du signal (elle ne le porte pas hein) quand elle transforme le substrat en un produit coloré; l'intérêt de cette méthode c'est que l'enzyme n'est pas couplée aux Ac, puisque comme je viens de l'expliquer coupler des Ac c'est chiant et c'est cher. Du coup, avec les 2 Ac anti-peroxydases, l'enzyme ne s'accroche et ne reste sous forme de complexe PAP que là où sont les anticorps, c'est à dire l'endroit où les anticorps primaires ont reconnu leur cible! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
aymericz Posted February 26, 2019 Share Posted February 26, 2019 Salut @LaurineL, Si tu as les réponses à tes questions, penses à utiliser la fonction Meilleure Réponse, merci! Bonne journée ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
LauLAbricot Posted March 6, 2019 Author Share Posted March 6, 2019 @aymericz @NicoLqe merci pour vos réponses ! Belle journée ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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