cDNA

[Luciolette]

Bonsoir, 

Quand on nous dit dans un qcm “voici la séquence d’un cDNA obtenu par transcription inverse d’un ARNm”, es ce que ce cDNA est double brin donc il possède l’information codante portée par les 2 brins d’ADN ou es ce qu’il est simple brin et dans ce cas est complémentaire de l’ARNm et donc porte la même séquence que le brin matrice...

Merci de m’éclairer

[Parolier974]

Bonsoir 

Ce que j'ai compris est qu'il s'agit d'1 brin obtenu par reverse transcriptase grâce à une amorce oligo dT placé en 3' de l'ARN au niveau de la queue poly A. 

 

Ensuite on synthétise le brin complémentaire. 

A confirmer 

[Liliputienne]

Quand on te parle de cDNA il est généralement double brin, mais étant obtenu à partir de l'ARNm il ne contient que l'information se trouvant au niveau des exons. 

Voici comment se déroule la synthèse de ton cDNA :

•  Une amorce d'oligo dT s'hybride avec la queue poly A de l'ARNm.
• Il y a alors synthèse du DNA complémentaire de l'ARNm grâce à une Reverse Transcriptase (DNA polymérase RNA dépendante).
• Une terminale transferase ajoute alors de dC sur l'extrémité 3' de ton cDNA. 
• Il y a ensuite hydrolyse de ton brin d'ARNm
• Enfin la "queue poly C" (si on peut appeler ça comme ça) formée à l'extrémité 3' de ton premier brin de cDNA sert d'amorce une synthèse d'ADN complémentaire du brin de cDNA obtenu. Ainsi ton second brin de cDNA se synthétise grâce à une DNA polymérase DNA dépendante. 

Ainsi tu ne retrouves l'hybride DNA / ARNm qu'au milieu de la synthèse de ton cDNA, avant l'hydrolyse du ARNm. 

Bonne journée