Ancien Responsable Matière Pims Posted November 3, 2018 Ancien Responsable Matière Share Posted November 3, 2018 Slt ^^ Je comprend à peu près le principe de la chromatographie par échange de cations, mais je n'arrive pas à saisir comment je fais si j'ai un mélange d'AAs, pour savoir ds quel ordre ils seront élués... Et bonne aprem ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution chloe2948 Posted November 3, 2018 Solution Share Posted November 3, 2018 Salut ! Alors dans une chromatographie par échange de cations tu prendrais dans bille dans ta colonne qui sont anionique (afin de fixer les cations justement). A partir de là, on te donne normalement un gradient de pH par exemple "le mélange est déposé à pH2 avec un gradient croissant jusqu'au pH10". Lorsque l'on dépose les acides aminés à un pH2, qui est acide, ils sont tous chargés positivement et se fixent aux anions de la colonne. De ce fait, en utilisant les pHi des différents acides aminés qui te sont proposés, tu peux déterminer l'ordre d'élution : quand on acide aminé se trouve dans la zone de son pHi il n'est plus ni anionique ni anionique et de ce fait, il n'accroche plus à la colonne et est élué. J'espère avoir été suffisamment claire, bonne aprem à toi aussi ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Pims Posted November 3, 2018 Author Ancien Responsable Matière Share Posted November 3, 2018 Aah oui ok d'accord J'ai compris merci bcp Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
ROBS Posted November 3, 2018 Share Posted November 3, 2018 Salut Je confirme ce qu'a dit @chloe2948 effectivement lorsque le pH = pHi de l'acide aminé on a la forme zwitterion (forme neutre) et lorsque le pH dépasse le pHi de l'acide aminé il prend sa forme anionique et se détache de la colonne. Donc lorsqu'on augmente le pH, les acides aminés sont élués par ordre croissant de leur pHi --> plus le pHi est bas plus l'acide aminé sera élué en premier. Il faut donc que tu aies un ordre d'idée du pHi des différents acides aminés. Bonne soirée et bon courage ! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Ancien Responsable Matière Pims Posted November 4, 2018 Author Ancien Responsable Matière Share Posted November 4, 2018 D'accord merci bcp !!! Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
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