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confocale VS biphotonique


Florian
Go to solution Solved by Manon92,

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Salut ttw !

 

Une petite question sur les techniques concernant la comparaison entre la microscopie confocale et biphotonique.

Le poly évoque que la microscopie biphotonique dégrade moins les échantillons que la microscopie confocale jusque là c'est ok puis pour expliquer cela, il y a marqué "due à la localisation de l'excitation". Ma question est donc quelle est cette différence de localisation ? Où a lieu l'excitation pour la microscopie confocale ? Et biphotonique ?

 

Petite question bonus (débile ?) : est ce que l'on considère que l'excitation monophotonique fait parti de la microscopie biphotonique ?

 

Merci d'avance, bonne journée ?

Edited by Florian
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  • Solution

Salut ! ?

 

Dans la microscopie confocale, un laser est concentré sur un point focal pour rassembler le maximum de photons excitateurs sur ce point focal. Mais comme tu peux le voir dans le schéma, les photons envoyés par le laser (en gris sur le schéma du poly) provoquent des absorptions sur tout leur trajet dans le cône d'excitation, donc l'excitation n'est pas seulement localisée au point focal.

 

Alors qu'en microscopie biphotonique, on concentre les photons uniquement sur le point focal dans un petit volume, donc on aura de l'excitation au niveau du point de focalisation surtout.

 

C'est pour ça que les dommages sont moins important pour la microscopie biphotonique, parce qu'ils sont concentré à une zone plus restreinte, tandis que la microscopie confocale a une zone qui peut potentiellement présenter des dommages plus étendue comme les photons ne sont pas concentrés strictement à une seule zone.

 

Pour ta 2e question, ce n'est pas spécifié explicitement sur le poly, mais le principe de la microscopie biphotonique est d'utiliser 2 photons (donc excitation binophotonique).

 

L'excitation monophotonique fait plutôt référence à la fluorescence classique.

 

Bonne journée ?

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