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BRET c'est la fête


Murdoc

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  • Ancien du Bureau

Salut !

En relisant un peu le TD des questions me viennent sur le BRET

Dans les exercices de où on a un BRET entre le récepteur et la protéine G :

  • On aura toujours un récepteur précouplé selon les nouveaux modèles ?
  • L'ajout d'un agoniste provoque l'augmentation du signal ?
  • L'ajout d'un antagoniste partiel provoque une diminution du signal ?
  • L'ajout d'un agoniste inverse supprime le signal ? (si l'agoniste inverse existe bien)

 

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il y a 5 minutes, Murdoc a dit :
  • L'ajout d'un agoniste provoque l'augmentation du signal ?
  • L'ajout d'un antagoniste partiel provoque une diminution du signal ?

oui et oui

 

epistEMO : chopin est dans le coup :o (parfaite ta signature)

il y a 6 minutes, Murdoc a dit :

L'ajout d'un agoniste inverse supprime le signal ? (si l'agoniste inverse existe bien

il le diminue du moins

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Coucou, tout dépend d'ou tu places les deux molécules qui vont intéragir --> EDIT : j'ai lu trop vite 

Je pense que oui c'est selon les nouveaux modèles, ceci dit il me semble que c'est précisé dans l'énoncé pour ce genre d'exercices, ou alors tu dois le deviner selon ce qu'on te dit 

 

EDIT bis : pas été assez rapide ... :ph34r:

Edited by ggath
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  • Ancien du Bureau

Ok merci @pépéLS, ça colle avec ce que j'en avais conclu ^^ (j'adore ton nouveau nom héhé)

il y a 2 minutes, ggath a dit :

tout dépend d'ou tu places les deux molécules qui vont intéragir 

Yes c'est pour ça que je précise dans le cas de l'interaction Rc et protéine G, parce que je trouve ce cas de figure plus ambigu ^^

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il y a 6 minutes, Murdoc a dit :
  • On aura toujours un récepteur précouplé selon les nouveaux modèles ?
  • L'ajout d'un agoniste provoque l'augmentation du signal ?
  • L'ajout d'un antagoniste partiel provoque une diminution du signal ?
  • L'ajout d'un agoniste inverse supprime le signal ? (si l'agoniste inverse existe bien)

On peut faire un récap là svp 

--> Sur un RCPG avec BRET
Agoniste : 
Antagoniste :
Agoniste inverse : 

Parce que je crois que je me suis perdu ...

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  • Ancien du Bureau
il y a 1 minute, Magnum a dit :

Oui oui pourquoi on parle d'autres choses là ? 

Non non, c'est juste que dans le TD 1 Senard a bien dit que dans ce BRET là on considère qu'il y a un précouplage par défaut, il me semble !

En tout cas c'est ce qui est marqué sur sa diapo

1.jpg

Du coup cela veut dire qu'un agoniste ne sépare pas la prot G du récepteur, non ? Et du coup augmente bien le signal ou en tout cas ne le fait pas diminuer. C'est ce que je comprends avec ce schéma en tout cas

2.jpg

 

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il y a 7 minutes, pauline98 a dit :

Saluut!

juste on est d'accord que il y a une augmentation du signal en ajoutant un agoniste que si on est en vision classique? Avec la vision moderne on aurai plutôt une diminution? :)

Salut Pauline! Pr moi si on ajoute un agoniste , en vision moderne, et avec les fluorophores sur le récepteur et sur alpha, on aura une augmentation.. (et une diminution si les fluorophores sont sur alpha, et beta gamma)

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Vision classique : Rluci sur alpha GFP sur b/g

Agoniste : Diminution du signal
Antagoniste : Signal identique
Agoniste inverse : augmentation du signal

Vision moderne : Rluci sur a/b/g et GFP sur RCPG

Agoniste : Augmente le signal
Antagoniste :  ? 
Agoniste inverse : ?

Hesitez pas à me dire, j'arrive à trouver de réponse pour la vision moderne, même si j'ai une idée...

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Bon y'a un truc que je comprend pas alors :(

J'ai noté au TD et ça me semblait logique: "avec ajout d'un agoniste, en vision classique, on recrute la protéine G donc augmentation du signal. "

 

Du coup en vision moderne comme y'a déja précouplage on met l'agoniste ça va se découpler, je comprend pas pourquoi le signal augmenterai..

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  • Ancien du Bureau
il y a 7 minutes, Magnum a dit :

Vision moderne : Rluci sur a/b/g et GFP sur RCPG

Agoniste : Augmente le signal
Antagoniste :  ? 
Agoniste inverse : ?

Je pense que

Antagoniste : Diminue le signal partiellement

Agoniste inverse : Diminue ++ le signal (mais ne le supprime pas forcément complètement)

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il y a 1 minute, Murdoc a dit :

Antagoniste : Diminue le signal partiellement

Je suis d'accord avec toi, mais pour l'antagoniste je pensais à autre chose, tu me dis ce que t'en penses

Si c'est antagoniste compétitif : pas de soucis diminution du signal 
Si c'est antagoniste non compétitif : pas de changement de conformation --> signal identique

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  • Ancien du Bureau
il y a 9 minutes, pauline98 a dit :

on met l'agoniste ça va se découpler

Il me semble (j'ai besoin de la confirmation de sainte @pépéLS ) qu'en présence d'agoniste inverse ça se découple, mais en présence d'agoniste tout court non ..

à l’instant, Magnum a dit :

Si c'est antagoniste non compétitif : pas de changement de conformation --> signal identique

Yes je suis d'accord !

Je ne me souviens pas d'avoir vu un exercice ou la notion d'antagoniste compétitif / non compétitif était mentionnée par contre, déjà que c'est super casse tête haha

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il y a 17 minutes, pauline98 a dit :

J'ai noté au TD et ça me semblait logique: "avec ajout d'un agoniste, en vision classique, on recrute la protéine G donc augmentation du signal. "

 

Ça Jsuis d'accord ! 

 

Pr la suite, c'est la sous unité alpha qui se sépare de beta gamma pr se coupler au recepteur , donc diminution du signal si les fluorophores sont sur alpha et sur beta gamma, et augmentation si fluorophores sur récepteur et sur alpha...

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  • Ancien du Bureau
il y a 2 minutes, pauline98 a dit :

C’est si le recepteur est constitutivement actif

Oui c'est bien de ça que je parle haha

 

Je suis parti sur un récepteur constitutivement actif parce que dans son TD Senard a plus ou moins expliqué que dans les exercices de BRET récepteur / protéine (et non pas BRET entre les dfférentes sous unités de la protéine G, ça c'est un autre raisonnement) il considérait qu'ils étaient tous précouplés !

 

Je sais pas si ça clarifie ou t"embrouille plus :/

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il y a 28 minutes, Magnum a dit :

Vision classique : Rluci sur alpha GFP sur b/g

Agoniste : Diminution du signal
Antagoniste : Signal identique
Agoniste inverse : augmentation du signal

Vision moderne : Rluci sur a/b/g et GFP sur RCPG

Agoniste : Augmente le signal
Antagoniste :  ? 
Agoniste inverse : ?

Hesitez pas à me dire, j'arrive à trouver de réponse pour la vision moderne, même si j'ai une idée...

salut ! 

 

alors je suis pas d'accord : pour moi vision classique : pas de précouplage : donc pas d'agoniste inverse 

 

vision moderne 

agoniste diminue le signal

: état basal : constant

agoniste inverse : augmentation du signal 

 

je me base sur ça

1526466148-capture-d-ecran-2018-05-16-a-

qui est d'accord/pas d'accord ? 

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En fait il y a un erreur au niveau de vision classique et vision moderne ... Autant pour moi j'ai écris trop vite 

Vision moderne : Rluci sur alpha GFP sur b/g

Agoniste : Diminution du signal
Antagoniste : Signal identique
Agoniste inverse : augmentation du signal

Vision classique : Rluci sur a/b/g et GFP sur RCPG

Agoniste : Augmente le signal
Antagoniste :  ? 
Agoniste inverse : ?

Au final les emplacements de Rluci et GFP étaient les bons mais pas avec le bon nom de vision @Fonktiondonde ca colle maintenant 

Edited by Magnum
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  • Ancien du Bureau

Bon.
Avant toute chose, mettons nous d'accord

  • En vision classique, la protéine G est à distance du récepteur. Lors de l'activation et se couple au récepteur, puis les sous unités a et b/g se dissocient
  • En vision moderne, la protéine G est déjà couplée au récepteur.

Dans la vision moderne, les sous unités alpha et beta / gamma sont elles associées ou dissociées ?

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