Kinase Posted January 9, 2018 Share Posted January 9, 2018 Bonsoir, J'ai un petit problème avec la question A qui est comptée vraie or pour moi il manque la ligase. La question E vrai aussi, je ne comprends pas comment on peut commencer une transformation bactérienne sans que les liaisons phosphodiesther soient effectués. En fait j'ai un problème avec les liaisons quoi Merci d'avance Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Marie_E Posted January 9, 2018 Share Posted January 9, 2018 Salut ! L'item A est bien vrai mais effectivement, il y a un "trou" dans la plasmide obtenu du fait de l'absence de mécanisme permettant la formation de cette dernière liaison (on pourrait éventuellement utiliser une ligase). Pour l'item E : justement, tu utilises la bactérie pour faire la dernière liaison qu'il te manque ! elle va "reconnaitre" qu'il y a un trou et activer des systèmes de réparation et/ou ligase (je ne sais pas trop lequel exactement) mais elle va former cette dernière liaison. Ce n'est pas un problème si le plasmide n'est pas complet puisque la transformation bactérienne consiste à "ouvrir" la bactérie pour y faire entrer le plasmide. Le plasmide n'a aucun rôle pour entrer dans la bactérie. Il commence à fonctionner une fois qu'il est confortablement installé dans la bactérie. J'espère que ces items sont plus clairs désormais n'hésite pas à me dire si jamais ce n'est pas le cas bon courage Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Kinase Posted January 9, 2018 Author Share Posted January 9, 2018 D'accord merci ! Mais j'ai quand même encore une petite incompréhension. Comment on peut valider la question A en sachant qu'après l'étape 2 un plasmide "refermé" est schématisé, si il n'y a pas de ligase il ne pourra pas se refermer non ? Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Marie_E Posted January 10, 2018 Share Posted January 10, 2018 Je ne sais pas trop... ça me paraissait logique mais j'avoue que le schéma n'est pas super clair non plus. :/ je fais remonter ta question aux autres tuteurs génome pour voir si l'un d'eux à une meilleure réponse à te donner Oui pour moi il faut une ligase pour fermer totalement le plasmide mais après je ne connais pas toutes les enzymes et protéines de la bactérie, donc s'il le faut, ce n'est pas une ligase qu'elle utilise mais une autre enzyme qui a la même fonction que la ligase. mais le prof ne te piégera pas sur ça étant donné qu'il ne décrit pas avec précision les enzymes et protéines de la bactérie dans son cours. Ou alors il te guidera dans l'énoncé Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Kinase Posted January 11, 2018 Author Share Posted January 11, 2018 D'accord, j'attends la réponse d'un tuteur alors Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Membre d'Honneur Sahra Posted January 15, 2018 Membre d'Honneur Share Posted January 15, 2018 Salut Baptiste99, Il y aura effectivement un petit espace à cause de l'absence de la ligase, mais vu que tu clones grâce à une étape de PCR, tu n'auras qu'un espace par brin comme pour le clonage habituel (avec déphosphorylation), comme tu vois à la diapo 119 : Ici c'est un peu pareil mais on a pas eu besoin de ligase puisque on a polymérisé, du coup il nous reste que la liaison phosphodiester finale à faire (ici encadrée en bleu dans ce schéma artistiquement et excellemment réalisé ) et elles seront faites dans la bactérie : J'espère que tu y vois plus clair? N'hésite pas si c'est pas le cas! Bon courage pour cette dernière semaine! Que ton génome te garde Quote Link to comment Share on other sites More sharing options...
Recommended Posts
Join the conversation
You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.
Note: Your post will require moderator approval before it will be visible.