llp08 Posted October 25, 2017 Posted October 25, 2017 bonjour, je suis actuellement bloquée sur la question 10-B des qcm d'annale de technique p101 du livre de genome. En effet je n'arrive pas a comprendre pourquoi cet item est faux. Car si l'on dégrade l'ARNm à amplifier, il serais normal de ne pas le voir apparaitre, mais de voir tout de meme le marquage du ménage qui lui est du cDNA.
VM-Varga Posted October 25, 2017 Posted October 25, 2017 Bonjour, Je pense que c'est faux car ton ARNm sert de matrice à la synthèse de ton cDNA. S'il est dégradé, ton cDNA ne peut pas être synthétisé via la RT, du coup il serait impossible de le voir EDIT : Je viens de voir que le sujet a déjà été traité par Mlle Patate Licorne ici, n'hésite pas à faire des recherches avant
llp08 Posted October 25, 2017 Author Posted October 25, 2017 donc en fait notre cDNA ménage viens de l'ARNm du gene X aussi ?
VM-Varga Posted October 25, 2017 Posted October 25, 2017 Non, il serait issu d'un autre ARNm, l'ARNm Ménage, présent lui aussi dans le mélange avec l'ARNm X. Du coup, si l'un est dégradé, l'autre aussi, d'où la tournure du l'item : "... la dégradation des ARNm"
Solution Netvink Posted October 26, 2017 Solution Posted October 26, 2017 En effet, on réalise 2 RT-PCR simultanées : une pour amplifier le gène X d'intérêt, et une pour amplifier un gène de ménage qui servira de témoin. Si après migration, je peux visualiser mon produit d’amplification du gène de ménage (témoin), alors cela signifie que mon mélange d'ARN initial n'a pas pu être dégradé (puisque a subi rétrotranscription suivie d'une PCR).
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