contrate de phase et contraste interférenciel

[sahrag]

Bonjour,

J'ai une petite question concernant la microscopie optique sans coloration en Biocell

Est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer la différence entre le contraste de phase en le contraste intérférentiel (Nomarski)  svp?

 

Merci d'avance à celui ou celle qui saura m'éclairer

[VM-Varga]

Bonjour bonjour !

 

A notre niveau c'est la même technique, une visualisation du décalage de phase de la lumière. La seule différence importante à retenir, c'est qu'en contraste interférentiel (Nomarski) tu as une apparence de relief.

[sahrag]

Bonjour

Ok merci beaucoup
​Mais du coup une "apparence de relief" ce n'est pas une "idée exacte" on est bie d'accord?

[VM-Varga]

On est bien d'accord. D'ailleurs, tu le vois page 8 du poly de TD, on a l'impression que le noyau du fibroblaste ( B ) est creux alors que ce n'est pas le cas

[sahrag]

Ah oui, bien vu pour les images de fibroblastes, j'avais effectivement pas remarqué. Merci bcp

Ah et j'ai encore une petite question : je n'ai pas compris à quoi servait la congélation rapide à- 160 °C lors de la microscopie cryoéletronique 

[DelphG]

Coucou !!

 

Alors la congélation à -160°C permet d'éviter la formation de cristaux de glace. Il me semble que c'est mentionné dans le poly. Ce qui pourrait créer des artefacts et déformer la structure biologique observé.

(Je crois également que pour certaines technique les cristaux de glace créés des phénomène de diffraction mais ici c'est surtout la structure que ça influence)

 

En espérant t'avoir aidé

[FlorianB]

Salut sahrag !

 

Pour ta première question je confirme ce que VM-Varga a dit, le contraste interférentiel de Nomarski donne une apparence de relief que le contraste de de phase ne donne pas (l'image est seulement très contrastée).

 

 

Je confirme aussi ce que Delphine a dit pour ta deuxième question, la congélation rapide à -160° permet d'éviter la formation de cristaux de glace, mais aussi de conserver la structure native de l'échantillon (ce qui est difficile avec les produits chimiques (fixateurs, résines...) utilisés dans d'autres techniques que la microscopie cryoélectronique, qui peuvent en modifier la structure).