Rangueil 2014 (souriiis)

[Chalize]

Bonjour, voici l'énoncé

Chez des souris d'un fond génétique défini, soit un gène g, codant pour une protéine G, porté par un autosome et spécifiquement exprimé dans les fibres musculaires striées squelettiques.

Vous souhaitez disposez de souris génétiquement modifiées :

- d'une part, des souris dont les 2 allèles du gène g sont invalidés (ou KO, souris -/-)

- d'autre part des souris surexprimant le cDNA du gène g spécifiquement dans les fibres musculaires striées squelettiques (souris dites [+/+ , TgM] )

 

Voici les 2 items que je ne comprend pas :

 

B. Des souris -/- pourront être obtenues par injection d'un gène g floxé dans le pronucleus mâle d'un ovocyte fécondé puis réimplanté dans l'utérus d'une souris pseudo-gestante. FAUX

 

D. Des souris [+/+ , TgM] pourront être obtenues par recombinaison homologue en utilisant des cellules ES dans lesquelles vous exprimerez la recombinase Cre sous le contrôle d'un promoteur spécifique des fibres musculaires striées. FAUX

 

Merci !

[castille]

Bonsoir Navarog,

 

L'item B est faux car si l'on veut inactiver un gène par le système crelox (gène floxé + recombinase cre) il faut faire des la recombinaison homologue, OR pour faire de la recombinaison homologue, on utilise des cellules souches pas une injection dans un pronucleus mâle.

 

Pour l'item D , c'est l'inverse on veut surexprimer un gène, pour cela il suffit juste d'injecter ce gène dans le pronucleus mâle ! Si l'on fait une recombinaison homologue avec le système crelox , d'une on ne surexprime pas le gène mais en plus on le supprime.

 

Donc si je te résume (sans détailler les protocoles en entier) :

-Pour supprimer l'expression d'un gène (ou modifier le gène) => recombinaison homologue sur des cellules ES (avec un système crelox par exemple) 

-Pour surexprimer un gène=> Injection de ce gène dans le pronucléus mâle  

 

En espérant que tu aies compris ^^. 

[Chalize]

C'est parfait merci beaucoup