SDS page

[mathoulematou]

bonjour, je ne comprends pas 2 item de ce qcm: 

QCM 15 – Des chercheurs ont analysé 4 protéines (masses moléculaires données ci-dessous) sont séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS. 1 : Immunoglobine G (PM : 150 kDa, pI=8 ), 2 : Albumine (PM : 66 kDa, pI=4,9 ), 3 : Myoglobine (PM : 17,2 kDa, pI=7 ), 4 : Tubuline α (PM : 50 kDa, pI=5,3 ) :

A. L'ordre de migration décroissant des protéines sur le gel est : 1,2,4,3. VRAI

B. L'ordre de migration décroissant des protéines sur le gel est : 3,4,2,1. FAUX 

J'ai mis le contraire car décroissant= celle qui va le plus loin>celle qui va le moins loin, donc de la plus légère a la plus lourdes? 

D. Les 4 protéines sont ensuite séparées par isoélectrofocalisation (IEF), leur migration de l'extrémité négative à l'extrémité positive serait : 1, 3, 4, 2.  VRAI: mais si on a traité les prot au sds page, elles sont toutes négatives, on ne peut plus faire IEF ? 

 

petite question en plus: une protéine constituée de dimères, les 2 sous unités ont forcément la meme tailles ? exemple: protéine X de taille 50kDa, dimérique: donc deux sous unités de 25kDa ou on peut avoir 30 et 20 ? 

 

Merci ! 

Edited January 21 by mathoulematou

[Lulu_le_Fou]

Salut @mathoulematou

il y a une heure, mathoulematou a dit :

QCM 15 – Des chercheurs ont analysé 4 protéines (masses moléculaires données ci-dessous) sont séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS. 1 : Immunoglobine G (PM : 150 kDa, pI=8 ), 2 : Albumine (PM : 66 kDa, pI=4,9 ), 3 : Myoglobine (PM : 17,2 kDa, pI=7 ), 4 : Tubuline α (PM : 50 kDa, pI=5,3 ) :

A. L'ordre de migration décroissant des protéines sur le gel est : 1,2,4,3. VRAI

B. L'ordre de migration décroissant des protéines sur le gel est : 3,4,2,1. FAUX 

J'ai mis le contraire car décroissant= celle qui va le plus loin>celle qui va le moins loin, donc de la plus légère a la plus lourdes?

Alors attention, décroissant c'est du plus gros/lourd au plus petit/léger, donc de la protéine la plus lourde qui va le moins loin  à la protéine la plus légère que va le plus loin,

effectivement c'est un peu ambigue cette histoire d'ordre de migration décroissant mais je pense vaut mieux le voir comme ça ! 

 

il y a une heure, mathoulematou a dit :

D. Les 4 protéines sont ensuite séparées par isoélectrofocalisation (IEF), leur migration de l'extrémité négative à l'extrémité positive serait : 1, 3, 4, 2.  VRAI: mais si on a traité les prot au sds page, elles sont toutes négatives, on ne peut plus faire IEF ? 

Enfaite l'IEF c'est plutôt par rapport au pHi et on utilise un gradient de pH, mais en général dans l'électrophorèse 2D y'a deux étapes, la première c'est le IEF où les protéines sont séparés selon leur pHI, on dépose toutes les protéines à un même pH (elles peuvent être chargés positivement ou négativement) et migrent en fonction vers le pôle + ou - 

 

Puis la deuxième étape c'est la SDS PAGE avec la dénaturation et tout, 

Mais oui tu as raison pour l'IEF, nos protéines sont chargés à un certain pH et ne sont pas forcément toutes négatives 

C'est un peu maladroit dans le QCM

Il y a 1 heure, mathoulematou a dit :

petite question en plus: une protéine constituée de dimères, les 2 sous unités ont forcément la meme tailles ? exemple: protéine X de taille 50kDa, dimérique: donc deux sous unités de 25kDa ou on peut avoir 30 et 20 ? 

pas forcèment la même taille, mais en général les tailles des unités sont précisés, si on vous dit rien là dessus (genre qu'elles ne font pas la même taille ou que les dimères ne sont pas identiques) partez du principe que les deux sous unités sont égales

MAIS NORMALEMENT c'est précisé dans l'énoncé ! 

 

Je sais pas si ça répond à toutes tes questions, sinon n'hésite pas, bon courage