ninapls Posted March 29, 2016 Posted March 29, 2016 Salut, J'aurai aimé savoir qu'elle est la différence concrète entre l'ELISpot et le Dot blot? Pourquoi pourrait on en utiliser un et pas l'autre ? Merci d'avance
Solution Soso01 Posted March 29, 2016 Solution Posted March 29, 2016 Salut ! L'ELISpot permet un comptage des cellules et non pas un dosage. Au préalable, on aura fixé des antigènes sur le fond du puits et ensuite on viendra mettre les cellules. Si elles sécrètent des anticorps spécifiques de l'antigène fixé, on aura une interaction entre les deux. On met ensuite un anticorps marqué qui reconnait l'anticorps sécrété par la cellule. De cette façon, chaque tâche que tu observeras correspondra à une cellule. Le Dot Blot permet un dosage. On ne fixe rien sur la membrane de nitrocellulose. On met la protéine puis on va venir mettre un anticorps spécifique qui va reconnaitre une séquence de cette protéine (=antigène) puis un 2ème anticorps marqué dirigé contre le premier. Si la reconnaissance se fait, on aura le produit coloré de l'enzyme fixé sur le 2ème anticorps qui pourra être dosé. Dans l'ELISpot, l'anticorps est apporté par une cellule alors qu'avec le Dot blot tu apportes un antigène. J'espère avoir répondu à ta question.
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