EX : IMMUNOPRÉCIPITATION (IP)

[SELMATOMIQUE]

bonjour, je comprends pas un truc avec cette image du cours d’aujourd’hui en gros on nous dit que la protéine vif est dépendante de la protéine MDM2 mais alors pourquoi elle apparais dans le lysat cellulaire même sans MDM2.

 

Merci d'avance

[barbiedocteur]

Coucou, est-ce que tu parle bien de cette image ? https://zupimages.net/viewer.php?id=23/04/mic8.png

Si oui je t'explique dès que je rentre 

Spoiler

sauf si bien sûr @CléMentheAL'Eau @loulou. @Caro-tides vous passez par là

 

[SELMATOMIQUE]

Oui c'est bien cette image mercii

[Cassolnousmanque2]

Coucou @SELMATOMIQUE

Comme présent sur le schéma de la diapo de cours, la protéine MDM2 fait le lien entre l'anticorps antiMDM2 et la protéine Vif 

Pour reprendre tous les éléments : 

- La bille est accrochée à l'anticorps antiMDM2 

- L'Anticorps antiMDM2 reconnaît la protéine MDM2

- La protéine MDM2 s'accroche (par intéraction) à la protéine Vif

 

Donc sans MDM2, Vif ne peut pas s'accrocher = on ne pourra pas la récupérer 

 

Tu as 2 lysats cellulaires : 

Dans le lysat 1 tu as : MDM2 et Vif  

Dans le lysat 2 tu as : Vif mais pas MDM2 

 

Ensuite à partir de chaque lysat, tu fais une expérience d'immunoprécipitation

Dans le lysat 1, tu as tous les facteurs nécessaires pour qu'il y ait interaction entre MDM2 et Vif 

Dans le lysat 1, il te manque MDM2 qui va faire le lien entre l'anticorps et Vif, donc Vif ne peut pas être récupéré

 

En gros dans le lysat cellulaire on te montre ce qu'il contient 

Dans l'IP on te dit ce qu'on a pu récupérer 

Donc dans le lysat 2 il y a quand même Vif, c'est juste que de par l'absence de MDM2, on n'a pas réussi à la récupérer

 

Tu comprends mieux ? 

[SELMATOMIQUE]

ouiiii super mercii