Qcm 6 D

[MonsieurCarcinome]

Salut je comprends pas du tout cet item, 

 

 

Someone said : post, wait, help is on the way…

merci(ouai je suis bilingue)

 

 

 

[Cassolnousmanque2]

Re @MonsieurCarcinome, 

Alors il faut déjà le plus simple serait de dessiner le plasmide recombinant que tu obtiens avec Yyy et Nnn  

Le voici : https://zupimages.net/viewer.php?id=23/01/5gjh.jpeg (ah oui j'ai pas précisé mais sur mon schéma, le G418R c'est le gène de résistance à la généticine), tu as en noir le plasmide initial et en orange l'insert

 

A. La généticine ne sera pas exprimée chez les procaryotes car le gène est soumis à un promoteur eucaryote. Par contre la séquence de l'ampicilline avec le clonage par Nnn et Yyy (on suppose que c'est celui là qu'on fait même si normalement on devrait avoir plus d'infos) va disparaître normalement donc la justification de l'item me paraît bizarre même s'il est quand même faux 

 

B. Taille insert = distance entre Yyy et Nnn = (Nnn - Eee) + (Eee - Kkk) + (Kkk - Yyy) = 300 + 400 + 30 = 730 bases 

Taille plasmide recombinant : 

D'abord on calcule la taille du fragment à enlever = distance entre Yyy et Nnn = (Nnn - Aaa) + (Aaa - Kkk) + (Kkk - Eee) + (Eee - Ddd) + (Ddd - Ddd) + (Ddd - Yyy) = 300 + 1000 + 3000 + 100 + 2000 + 600 = 7000 bases

Donc taille plasmide recombinant = 8000 - 7000 + 730 = 1730 bases = 1,73 kb

 

C. Après la digestion tu as 3 possibilités : Soit le vecteur se referme sur lui même (rien n'est inséré et rien n'est éliminé) -> c'est le vecteur vide 

Soit le vecteur a intégré l'insert -> c'est le vecteur recombinant 

Soit l'insert ne s'est pas intégré dans le vecteur (en pratique on met beaucoup plus d'inserts dans le milieu pour que statistiquement, tous les vecteurs soient recombinant à quelques exceptions près) 

Comme le vecteur non recombinant et le vecteur recombinant n'ont pas la même taille, on observera bien 3 bandes au total

 

D. Le plasmide recombinant que tu obtiens avec Nnn et Kkk est le suivant : https://zupimages.net/viewer.php?id=23/01/oa6w.jpeg (pareil, le plasmide initial est en noir, et l'insert en orange)

Ainsi, le gène de résistance à l'ampicilline est toujours présent. Comme tu vois qu'il est sous le contrôle d'un promoteur procaryote alors on peut utiliser cet antibiotique chez les bactéries 

Pour le gène dnsLMSN, il est sous le contrôle d'un promoteur eucaryote donc il pourra être exprimé chez les souris

 

E. Ce n'est pas parce que le transfère est intégré dans le génome qu'il sera forcément exprimé

Normalement, au S1 on vous a dit que la partie codante est une infime partie du génome eucaryote. 

 

 

 

[MonsieurCarcinome]

Merci pour ta reponse ducoups pour la C en gros

-un vecteur vide(sans l’insert)

-un vecteur recombinant(avec l’insert)

-un vecteur non recombinant(cad un vecteur qui s’est refermé comme au debut engros il a pas changé)

 

c’est bien sa ?

 

[Cassolnousmanque2]

Alors en gros c'est ça

il y a 9 minutes, MonsieurCarcinome a dit :

un vecteur vide(sans l’insert)

je rajoute juste une précision, le vecteur vide est linéaire du coup parce qu'il ne peut pas se linéariser à nouveau puisque les enzymes de restriction sont différentes et non compatibles