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Clonage non orienté


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Posted

Bonjour ! 😀

Je souhaitais savoir ce qu'était un clonage non orienté, car je n'ai pas compris ce que cela signifiait, pourriez-vous m'éclairer s'il vous plaît?

 

Je vous remercie d'avance !

  • Ancien Responsable Matière
Posted

Coucou @PH₂ !! 

alors tu as deux types de clonage : 

- le clonage orienté : tu utilises deux enzymes de restriction différentes et non complémentaires -> l'insert peut se mettre uniquement dans un seul sens 

- le clonage non orienté : tu utilises une seule enzyme de restriction ou deux enzymes complémentaires -> l'insert peut se mettre dans deux sens 

 

Tu comprends mieux ou tu as besoin d'un schéma ? 

Bon courage !!

Posted
il y a 3 minutes, Cassolnousmanque2 a dit :

Tu comprends mieux ou tu as besoin d'un schéma ? 

 

Coucou @Cassolnousmanque2 ! 

Juste une petite question : quand on dit enzymes complémentaires (ex A et B) cela signifie que la séquence peut aller de A vers B (si A avant B) ou B vers A (si B avant A)?

A part ça, j'ai tout compris, merci beaucoup ! 😄

  • Élu Etudiant
  • Solution
Posted

Coucou PH !

Pour comprendre le clonage orienté/non-orienté voici un superbe schéma fait en 2 minutes sur paint.net.

ovau.png

 

Tu peux voir que le clonage orienté n'est possible qu'avec 2 enzymes de restriction différentes comme le brin d'adn n'est pas coupé de la même manière des deux côtés. Par contre, le clonage non-orienté (on pourrait retourner l'insert et ça rentrerait quand même) n'est possible que si l'on utilise la même enzyme sur les deux sites, ou comme l'a dit @Cassolnousmanque2, deux enzymes complémentaires, qui couperont donc de la même manière, même si ce n'est pas sur les mêmes sites !

 

En espérant que c'est plus clair pour toi ! Et on ne juge pas mes talents de dessin à la souris 

Posted
Le 03/01/2023 à 14:36, AAAAH a dit :

Coucou PH !

Pour comprendre le clonage orienté/non-orienté voici un superbe schéma fait en 2 minutes sur paint.net.

ovau.png

 

Tu peux voir que le clonage orienté n'est possible qu'avec 2 enzymes de restriction différentes comme le brin d'adn n'est pas coupé de la même manière des deux côtés. Par contre, le clonage non-orienté (on pourrait retourner l'insert et ça rentrerait quand même) n'est possible que si l'on utilise la même enzyme sur les deux sites, ou comme l'a dit @Cassolnousmanque2, deux enzymes complémentaires, qui couperont donc de la même manière, même si ce n'est pas sur les mêmes sites !

 

En espérant que c'est plus clair pour toi ! Et on ne juge pas mes talents de dessin à la souris 

waw mais cest génial cest justement dun dessin que javais besoin je comprenais rien du tout tu mas sauvé la vie😭💚

  • 3 years later...
  • Responsable Matière
Posted
18 minutes ago, gabrielle_ltngr said:

Bonjour ! 

 

Comment on sait, dans le cas du clonage non orienté, si deux enzymes de restriction coupent de la même manière ? 

Bonjour, 

Enfaite les enzymes de restriction vise un site spécifiques qu'ils reconnaissent. La coupure qu'ils vont faire sera toujours la même dessus. Une même enzyme va toujours coupé de la même manière 

J'espère que c'est claire 🦈

Posted

Merci pour ta réponse !!

 

Donc si je comprends bien, deux enzymes complémentaires couperont de la meme manière pour que ça fasse un clonage non-orienté. Dans ce cas là, comment on peut savoir quand deux enzymes sont complémentaires? Ça sera indiqué dans l’énoncé ? 

  • Responsable Matière
Posted
3 minutes ago, gabrielle_ltngr said:

Merci pour ta réponse !!

 

Donc si je comprends bien, deux enzymes complémentaires couperont de la meme manière pour que ça fasse un clonage non-orienté. Dans ce cas là, comment on peut savoir quand deux enzymes sont complémentaires? Ça sera indiqué dans l’énoncé ? 

Ouai, après dans les QCM de la prof il y a généralement deux cas

1. Elle utilise une seul enzyme et dans ce cas c'est un clonage non orienté 

2. Elle utilise deux enzymes différentes (non complémentaires) donc le clonage ets orienté 

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