RT-PCR

[StabiloBoss]

Bonjour à tous, je n'ai pas très bien compris ctte méthode qlq1 veut bien m'aider svp 

et l'électrophorèse svp 

[Ambr1_d_adn]

Coucou !

 

La RT-PCR est une méthode d'analyse de l'ADN. "RT" c'est pour "Reverse Transcriptase", une enzyme capable de convertir l'ARN en ADN.

 

Tu pars donc de fragments d'ARNm. D'abord, une Reverse Transcriptase convertit l'ARNm en ADNc (complémentaire, donc seulement avec les exons).

Ensuite, il y a amplification de cet ADNc (comme dans une PCR classique).

 

Il est possible de mesurer la quantité d'ADNc produits. Cela reflètera la quantité d'ARN de départ. Pour cela, on peut utiliser une protéine fluorescente appelée SYBRgreen, qui se lit à l'ADN durant la phase de polymérisation (quand il est double brin).

 

Voilà, j'espère que cette réponse te sera utile !

 

Bon courage !

[Crème_glasset]

Salut! Pour ta question sur l'électrophorèse, donc en gros c'est une technique qui va permettre de caractériser et de séparer les espèces. Cette technique se base sur la migration des espèces en fonction de leur charge sur un gel en général sur lequel on applique un champs électrique. Donc la séparation se fait selon la charge de l'espèce mais aussi selon son poids moléculaire. Et du fait de leurs caractéristiques propres, les espèces migreront plus ou moins vite.

J'espère que ça va t'aider, si jamais t'as d'autres questions hésite pas :)

Bon courage !

[Cassolnousmanque2]

Coucou @zinez, je suis d'accord avec les deux réponses précédentes.

 

Pour l'électrophorèse, l'ADN est chargé négativement donc il sera attiré vers le pôle + 

Le maillage dans l'électrophorèse devient de plus en plus petit au fur et à mesure qu'on avance. Donc tes grosses molécules d'ADN migreront moins loin que les petites molécules d'ADN.

 

Est-ce que c'est plus clair pour toi ou pas ?