Techniques étude ADN, vecteurs réplication

[valoubistouri]

Salut :) j'aurais une petite question par rapport aux vecteurs utilisés en génie génétique : on nous dit qu'ils sont capables de réplication autonome mais ensuite on dit qu'ils sont non réplicatifs dans la cellule transduite, je suis un peu perdue ... 

[Pitchounou]

Salut @valentine_brd! Attention tu confonds plasmide et vecteur viral ! 

 

Le plasmide et le vecteur viral sont tous les deux des vecteurs. Néanmoins : 

• Le plasmide est capable de réplication autonome. C'est un ADN circulaire double brin issu des bactéries qui peut se répliquer grâce à une origine de réplication. C'est très pratique puisqu'on peut insérer de nombreux gènes dans un plasmide. 

 

• Le vecteur viral est non-réplicatif. C'est un virus vide dans lequel on a placé du matériel génétique. Pour faire ça on a injecté à une cellule lambda les gènes qui codent pour les protéines formant la capside, l'enveloppe etc. La cellule va produire toutes ces protéines et on va obtenir un virus vide. Il suffira ensuite d'insérer à l'intérieur le gène qu'on veut véhiculer.

 

C'est plus clair pour toi ? N'hésite pas sinon !

[valoubistouri]

Il y a 6 heures, Pitchounou a dit :

Salut @valentine_brd! Attention tu confonds plasmide et vecteur viral ! 

 

Le plasmide et le vecteur viral sont tous les deux des vecteurs. Néanmoins : 

• Le plasmide est capable de réplication autonome. C'est un ADN circulaire double brin issu des bactéries qui peut se répliquer grâce à une origine de réplication. C'est très pratique puisqu'on peut insérer de nombreux gènes dans un plasmide. 

 

• Le vecteur viral est non-réplicatif. C'est un virus vide dans lequel on a placé du matériel génétique. Pour faire ça on a injecté à une cellule lambda les gènes qui codent pour les protéines formant la capside, l'enveloppe etc. La cellule va produire toutes ces protéines et on va obtenir un virus vide. Il suffira ensuite d'insérer à l'intérieur le gène qu'on veut véhiculer.

 

C'est plus clair pour toi ? N'hésite pas sinon !

 

Ah oui d'accord c'est beaucoup plus clair merci !

Mais du coup ce qu'on met dans le vecteur viral, ça peut pas être un plasmide ? c'est juste un morceau d'ADN comme ça ?

Et on peut quand même injecter les deux dans procaryotes ET eucaryotes ?

 

[Pitchounou]

@valentine_brdalors effectivement tu ne mets pas de plasmide dans un vecteur viral, ce serait une perte de temps le plasmide étant déjà un vecteur tu n'as pas en plus besoin d'un virus.

Si tu veux le virus et le plasmide sont comme des "navettes" tous les deux, qui transportent des passagers.

Généralement oui c'est de l'ADN qu'on met dans les vecteur viraux (comme pour le vaccin Astrazeneca) mais il y a des études sur des virus à ARN en cours (mais ça c'est plus pour la culture). 

En gros retient globalement que dans ton plasmide ou dans ton vecteur viral tu mets un fragment d'ADN. 

 

Et tout à fait tu peux injecter dans procaryote et eucaryote ! Simplement si tu veux qu'une protéine soit produite par exemple tu devras bien faire attention à avoir un promoteur eucaryote ou procaryote en fonction. 

Ca va pour toi ? 

[valoubistouri]

Il y a 14 heures, Pitchounou a dit :

@valentine_brdalors effectivement tu ne mets pas de plasmide dans un vecteur viral, ce serait une perte de temps le plasmide étant déjà un vecteur tu n'as pas en plus besoin d'un virus.

Si tu veux le virus et le plasmide sont comme des "navettes" tous les deux, qui transportent des passagers.

Généralement oui c'est de l'ADN qu'on met dans les vecteur viraux (comme pour le vaccin Astrazeneca) mais il y a des études sur des virus à ARN en cours (mais ça c'est plus pour la culture). 

En gros retient globalement que dans ton plasmide ou dans ton vecteur viral tu mets un fragment d'ADN. 

 

Et tout à fait tu peux injecter dans procaryote et eucaryote ! Simplement si tu veux qu'une protéine soit produite par exemple tu devras bien faire attention à avoir un promoteur eucaryote ou procaryote en fonction. 

Ca va pour toi ? 

C’est parfait merci beaucoup !!