Jump to content

Encore des plasmides


Go to solution Solved by julierx,

Recommended Posts

  • Ancien Responsable Matière
Posted
il y a 8 minutes, chloemllfre a dit :

Bonjour,

Je ne trouve pas ces valeurs de fragments donnés dans la correction de l'item D QCM 3 p42

110 kDa / 310 kDa / 1630 kDa / 3800 kDa 😬

https://tutoweb.org/PDFs/Librairie/Archive PACES/Maraîchers/Annales concours/2018-2019/S2 - Concours Maraîchers - Mai 2019.pdf

Alors: 

-commençons par plaminine: tu as ta séquence entre HindIII qui fait 2600-1200pdb soit 1400pdb je sais pas pk tu parles en kDa (mais 1400 pdb = 1400/3 AA =~ 466 AA et 466*110 (car 1 AA= environ 110 Da) = 51260 = 51kDa ...

ensuite ton 2eme morceau c'est le plasmide plaminine à qui tu as clivé les 1400pdb soit 5200-1400 = 3800 pdb

et apres tu peux te concentrer sur pProm avec  hindIII = 310 pdb et donc tu fais tes 3200 (totaux)-310 = 2890pdb...

Et selon la méthode du scientifique, il aurait coupé  800 pdb (700+100) et il les auraient inséré au Plasminine qui lui, sera clivé que d'un morceau de 50, donc au final ca te ferait 5950 avant de couper par HindIII

 

mais à mon avis, 110 et 1630, ya un pb... et surtout "kDa" 

  • Solution
Posted (edited)

Salut @chloemllfre

 

Pour ce genre de QCM je te conseille de redessiner les plasmides et notamment le plasmide recombinant ça permet d'éviter les erreurs d'étourderie je trouve.

Ici, ton plasmide recombinant = ( plaminine - ( Pst1 - BamH1 ) ) + le promoteur issu de pProm entre BamH1 et Pst1 = 5200 - 50 + 700 = 5850 pb

 

Sur ton plasmide recombinant tu as maintenant 4 sites HindIII : les 2 qui étaient sur plaminine à 1200 pb et 2600 pb + 2 autres qui se trouvent sur le fragment comprenant le promoteur.

Et c'est là que ton dessin va te servir, parce que du coup le premier site à 1200 pb ne bouge pas mais ceux du promoteur qui occupent respectivement 10pb et 320 pb viennent s'additionner aux 1300 premières pb de plaminine. Donc 1310 et 1620 

Le dernier site se trouvait à 2550 pb mais on ajoute les 700 pb du promoteur donc 3250 pb.

 

Le premier fragment vaut 110 pb ( 1310 - 1200 ) , le deuxième 310 pb (1620 - 1310 ) , le troisième 1630 ( 3250 - 1620 ) pb et enfin le dernier 3800 pb ( le reste ) .

 

Si c'est pas clair, j'essaierai de te faire un dessin.

 

Bon courage <3 

 

il y a 15 minutes, Couzouféroce a dit :

 

Et selon la méthode du scientifique, il aurait coupé  800 pdb (700+100) et il les auraient inséré au Plasminine qui lui, sera clivé que d'un morceau de 50, donc au final ca te ferait 5950 avant de couper par HindIII

 

 

Coucou @Couzouféroce

 

Attention, il a coupé 700 pb étant donné qu'il a utilisé BamH1 et Pst1.

On aurait 800 pb si il avait utilisé uniquement BamH1 ( ce qui est possible mais le clonage aurait été non orienté ) .

Edited by julierx
  • Ancien Responsable Matière
Posted
il y a 51 minutes, julierx a dit :

Attention, il a coupé 700 pb étant donné qu'il a utilisé BamH1 et Pst1

Ah oui ok... j'avais précisé 700+100, mais je pensais que on allait avoir 2 sequences clivées, une de 700 BamH1-Pst1 et une de 100 Pst1-BamH1...

et du coup comment on sait que le 2eme de 100 ne se coupe pas ?

Posted
il y a une heure, Couzouféroce a dit :

Ah oui ok... j'avais précisé 700+100, mais je pensais que on allait avoir 2 sequences clivées, une de 700 BamH1-Pst1 et une de 100 Pst1-BamH1...

et du coup comment on sait que le 2eme de 100 ne se coupe pas ?

 

En fait il va être coupé mais en soit " on s'en fiche " parce que ce qui nous intéresse c'est simplement le fragment avec le promoteur qui se trouve entre BamH1 et Pst1 et c'est lui qui va se lier à plaminine :) 

  • Ancien Responsable Matière
Posted
il y a 6 minutes, julierx a dit :

 

En fait il va être coupé mais en soit " on s'en fiche " parce que ce qui nous intéresse c'est simplement le fragment avec le promoteur qui se trouve entre BamH1 et Pst1 et c'est lui qui va se lier à plaminine :) 

ah okok

Join the conversation

You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.
Note: Your post will require moderator approval before it will be visible.

Guest
Reply to this topic...

×   Pasted as rich text.   Paste as plain text instead

  Only 75 emoji are allowed.

×   Your link has been automatically embedded.   Display as a link instead

×   Your previous content has been restored.   Clear editor

×   You cannot paste images directly. Upload or insert images from URL.

  • Recently Browsing   0 members

    • No registered users viewing this page.
×
×
  • Create New...