QCM3 UE11 pharmacie poly tat "techniques d'étude de l'ADN"

[Keox]

Bonjour, pour l'item D du QCM3 sur le poly UE11 pharmacie du tat page 167, est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer la méthode pour résoudre ce genre d'item svp ?

Merci !

[Dr_Zaius]

 

Pour la D afin de déterminer la taille du plasmide recombinant (c'est à dire tout simplement le plasmide après insertion de la séquence d'intérêt) il faut procéder en deux étapes.

1) Déterminer quelles enzymes utiliser pour insérer la bonne séquence

2) Calculer

Donc dans un premier temps on va chercher les 2 sites de restriction (coupures) qui entourent la séquence codant la p53 et la GFP pour la détecter. Pour faire ça pas le choix il faut regarder la séquence de droite : on voit sur celle-ci que BamH1 et Xho1 font le travail. On se reporte à la figure de gauche et on localise les 2 sites de restrictions, ça tombe bien on voit qu'ils sont à 50 pdb l'un de l'autre BamH1 -> 1350 et  Xho1 -> 1400 .Il est temps de passer au calcul après action des enzymes BamH1 et Xho1 sur le plasmide sans la séquence on a une ouverture qui va permettre d'insérer la séquence mais on aura perdu - 50 pdb du plasmide initial la séquence GFP + p53 est comprise entre BamH1 et Xho1 (figure de droite) respectivement entre 670 et 1300 pdb donc elle mesure 1300 - 670 = 630 pdb 

-> le plasmide final fait donc 6200 pdb - 50 pdb + 630 pdb = 6780 pdb 

-> la D est donc juste

Bonne annéeeeeeeeee !!!!!

[Keox]

Ah yes super merci bcp!!! 

bonne année:)