Sénescence et mort cellulaire QCM prof

[Mrcc]

Heeeeyyy, 

 

est-ce que quelqu’un pourrai m’aider à lire et interpréter ce graphique s’il vous plaît ? 

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[Aurelim7]

  On 11/17/2021 at 12:06 PM, Mrcc said:

Heeeeyyy, 

 

est-ce que quelqu’un pourrai m’aider à lire et interpréter ce graphique s’il vous plaît ? 

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hellooo alors je vais essayer de t'expliquer

 

 

en gros dans l'énoncé on te parle de cellules incubées avec ou sans deux molécules A et B

 

On te dit ensuite qu'on marque les cellules avec de l'annexine V couplée à une molécule fluorescente dans le vert

-> là déjà il faut que dans ta tête tu penses : phosphatidyl sérine 

et en pensant aux PS, tu te rappelles qu'elles sont mises en évidence dans des cas où les cellules sont soit en apoptose (PS externalisées donc l'annexine V peut se coupler) soit en nécrose (augmentation de la perméabilité membranaire)

 

Ensuite dans l'énoncé on rajoute qu'on marque les cellules avec de l'iodure de propidium

-> dans ta tête tu penses : marqueur de la nécrose (car elle colore le noyau, qui n'est accessible que parce que la perméabilité de la mp a augmenté)

cette fois-ci, ça permet de détecter uniquement la nécrose

 

 

maintenant tu regardes les résultats :

 

dans les deux tableau tu as 3 colonnes, la première est la colonne témoin où en principe la cellule fonctionne "normalement" et c'est à partir de celle là que tu vas comparer les autres colonnes

 

dans le premier tableau tu vois que les cellules de la colonne 2 (en présence de la molécule A) et la colonne 3 (en présence de la molécule B) fluorescent toutes les deux dans le vert

tu en déduit que pour les cellules en présence des molécules A et B, l'annexine V a pu marquer des PS, on est donc soit en présence d'une nécrose, soit en présence d'une apoptose

mais juste avec ce tableau on ne peut pas en savoir plus

 

donc tu regardes le 2e tableau :

ici, tu vois que la cellule en présence de molécule A ne fluoresce pas dans le rouge alors que celle en présence de la molécule B fluoresce dans le rouge

c'est donc que la perméabilité de la membrane plasmique de la cellule B a augmenté (puisque l'IP a pu marquer son noyau), ce qui n'est pas le cas de la cellule en présence de la molécule A

 

 

tu peux donc conclure :

-> puisque la cellule en présence de la molécule A fluoresce dans le vert mais pas dans le rouge, c'est que ces PS sont externalisées, on est en présence d'une apoptose

-> puisque la cellule en présence de la molécule B fluoresce à la fois dans le vert et dans le rouge, c'est que la perméabilité de sa membrane a augmenté, on est donc en présence d'une nécrose

 

à partir de là normalement tu peux répondre aux questions

 

 

sinon, si c'est plus clair pour toi avec des images, je te renvoie au poly du prof, où tu pourras voir l'externalisation des PS, la perméabilité de la membrane plasmique qui augmente et les marquages associés :

 

 

est ce que c'est plus clair pour toi ?

Edited November 17, 2021 by Aurelim7

[phényléanine]

Saluutt, 

tu as ici deux marqueurs : l'IP : l'iodure de propidium qui fluoresce dans le rouge, et qui va rentrer dans les cellules perméables (sinon il ne peut pas marquer les cellules); et l'annexine V qui fluoresce dans le vert, qui a une forte affinité avec les phosphatidylsérines (PS) , autrement dit qui va marquer les PS.

Or tu sais que lorsque la cellule devient perméable c'est qu'elle est nécrosée, la membrane plasmique va se creuser par endroits, ce qui va provoquer l'oncose (entrée d'eau dans la cellule); et lorsque la cellule est en apoptose, il y a une externalisation des PS. 

 

 

 

Donc au final l'annexine V va marquer les cellules qui sont apoptotiques, et l'iodure de propidium va marquer les cellules nécrotiques.

 

( ! les cellules nécrotiques peuvent aussi être marquées par l'annexine V car la membrane plasmique est perméables, elle est trouées, donc même si les PS sont sur la membrane interne de la cellule, les molécules d'annexine vont pouvoir passer la MP pour interagir avec les PS, donc il y aura quand même une fluorescence verte pour les cellules nécrotiques)

 

Ensuite tu as deux molécules qui sont testées, la A et la B. Sur le graphique de gauche ( cellules en apoptose principalement et cellules en nécroses ) tu vois que les deux molécules A et B provoquent de la fluorescence, donc provoquent une apoptose ou une nécrose. Mais juste avec ce graphique tu ne peux pas dire quelle molécule provoque l'apoptose ou la nécrose.

C'est pour cela qu'il y a l'autre graphique (avec l'iodure de propidium). tu vois sur ce graphique que seule la molécule B provoque une fluorescence, donc tu en déduis que la molécule B provoque la nécrose. Et donc la molécule A provoque une apoptose. 

Le pic tout à gauche sur les deux graphiques (lorsqu'on ne met pas de molécule A ni de molécule B) est le pic témoin

 

Voila j'espère que c'est plus clair pour toi @Mrcc

 

trop rapide @Aurelim7

 

[fée_cloclochette]

Et coucou !! @Mrcc 

Je vais essayer de t'expliquer comment j'analyse ces graphiques. 

 

Reprenons le contexte tu souhaites tester 2 molécules A ou B. 

Celle-ci sont marquées par de l'annexine V (externalisation des phosphatidysérine qui te font penser a l'apoptose) qui colore en vert et par de l'iodure de propidium (qui entre uniquement dans les cellules qui ont une augmentation de leur perméabilité membranaire et donc de la nécrose) et qui colore en rouge. 

 

Pour ton premier graphique : 

                                                                    

 

Tu tests donc avec premièrement aucune des molécules : aucun marquage vert (ce qui est normal) 

puis tu tests uniquement avec ta molécule A qui est donc marqué positivement par l'annexine et pareil pour ta molécule B --> tu en conclus donc que tes 2 molécules A et B peuvent être en apoptose vu qu'elles sont toutes les deux marquées par l'annexine V. 

Mais sont-elles vraiment en apoptose ou au contraire en nécrose ? 

 

Pour savoir ça tu as la réponse dans ton deuxième graphique : 

                                                                

 

Tu tests donc avec premièrement aucune des molécules : aucun marquage rouge (ce qui est normal) 

puis tu tests uniquement avec ta molécule A qui est donc marqué négativement par l'iodure de propidium --> youpiii elle est n'est pas en nécrose mais bien en apoptose uniquement !  

et pour ta molécule B tu vois qu'elle réagit positivement a l'iodure de propidium elle est alors en nécrose !! 

 

J'espère avoir été claire et voilà que je vois que @Aurelim7 à déjà répondu ! 

 

Je t'envoie pleins de poussières de fée pour t'envoyer pleins de forces !  

 

[Mrcc]

@fée_cloclochette, @phényléanine, @Aurelim7Merciii bcp à vous tous c’est vraiment super gentil de tout me détailler comme ça!!! Mercii encore