M2017QCM1C (en vrai pourquoi on met M alors qu'on a que maraîch pour la recherche ?)

[MeuhMeuh]

Salut les Cowpains !

 

Je ne comprends pas pourquoi la C est vrai. Pour moi on voit que Pte1 coupe pour pCK-CXCL1 dans CXCL1, étant que ce sont des morceaux de gêne j'avais compris pour moi des gènes codant et que par conséquent celui-ci ne pourra être exprimé si je l'altère.

 

Du coup en soit, tant qu'on a un promoteur, terminateur plus clonage non-orienté, on peut automatiquement partir du principe que c'est bon ?

[OxyGenS]

Salut,

Ici on veut juste vérifier que notre cDNA est inséré dans le bon sens dans le plasmide recombinant.

Quand tu fais une expérience tu ne fais pas la manip pour un unique plasmide, tu fais plusieurs exemplaires.

Tu en prendras un pour vérifier et ça te permet de conclure pour tous les autres.

 

Ici tu vois que sur le plasmide pPACES tu as un site de restriction pour Pte1, idem sur le cDNA.

De plus ce site de restriction ne se situe pas à la moitié du cDNA

=> tu peux déterminer si ton insert est intégré dans le bon sens (en fonction des tailles de fragments que tu obtiendras)

[MeuhMeuh]

Ça marche merci bien petit poumon !