Benj152 Posted April 25, 2021 Posted April 25, 2021 Salut! https://zupimages.net/viewer.php?id=21/16/6gay.png Pour le C (compté vrai), comment savoir qu'elles ont toutes été transfectées efficacement ? Sur le WB on voit que A exprime les gènes mais pas les 3 autres (pourquoi?) ? Est ce que ça veut pas dire que A étais déjà capable d'exprimer ces gènes ? Dans ce cas on pourrait pas savoir si elle a produit les ARNm (en RTPCR) d'elle même ou grâce au vecteur transfecté ? Merci! Quote
Solution Charette Posted April 25, 2021 Solution Posted April 25, 2021 Salut ! @Benj152 Il faut se référer à la RT PCR, en effet elle permet de quantifier (et donc de détecter) les transcrits. On voit sur les résultats de la RTPCR que les cellules A B et D ont bien produits des transcrits pour les gènes α et/ou bêta. Donc elles ont été transfectées efficacement. Ensuite comme tu le dis le WB va permettre de voir si la protéine est bien exprimée. On voit que la cellule A est la seule à traduire les gènes, ça ne veut pas dire que les autres d'expriment pas les gènes (juste ils ne les traduisent pas, comme dit dans l'item A). Il y a 4 heures, Benj152 a dit : Sur le WB on voit que A exprime les gènes mais pas les 3 autres (pourquoi?) ? Est ce que ça veut pas dire que A étais déjà capable d'exprimer ces gènes ? Dans ce cas on pourrait pas savoir si elle a produit les ARNm (en RTPCR) d'elle même ou grâce au vecteur transfecté ? Pour ces questions en revanche, l'exercice ne donne pas de précision donc on n'est pas en mesure de savoir pourquoi, on n'a pas de comparaison avec l'expression d'avant la transfection (mais si on part du principe que ces gènes ont été introduits, la A ne devait pas les exprimer avant), et du coup la dernière question on ne peut pas savoir non plus --> pas de comparatifs. Quote
Benj152 Posted April 25, 2021 Author Posted April 25, 2021 il y a 39 minutes, Charette a dit : Ensuite comme tu le dis le WB va permettre de voir si la protéine est bien exprimée. On voit que la cellule A est la seule à traduire les gènes, ça ne veut pas dire que les autres d'expriment pas les gènes (juste ils ne les traduisent pas, comme dit dans l'item A). Sur le WB on voit seulement les protéines ? Quote
Charette Posted April 25, 2021 Posted April 25, 2021 Oui, le western blot permet de détecter spécifiquement des protéines (donc si elles sont présentes ou non). Benj152 1 Quote
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