Lilou Posted April 7, 2021 Posted April 7, 2021 Bonjour, quelques question sur l'annale M2014 :  1) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/5924.png https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/245m.png petit soucis ici dans la correction "La digestion du plasmide pXP par Xho1 donne un fragment de 630 pb (nombre de paires de base entre les deux sites de restriction pour Xho1) et un fragment de 3570 pb." Or je trouve 630pb (1200-570) et 3370 (4000-630) du coup est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer ou je fais erreur ?  2) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/x7he.png A VRAI j'ai pas bien compris, il ne s'exprime pas que au niveau de la peau ?  3) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/s49k.png AB VRAI alors là gros pb A je ne comprends pas pq c'est indépendant ... B déjà c'est une peu contradictoire de mettre les 2 vrai en plus non ? et comment on sait que c'est direct ?  4) https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/mtt8.png C VRAI et D FAUX Je ne comprends pas, le "+" dans le graphe signifie qu'il y a une extinction de la prot DICER non et du coup qu'elle est absente ? j'avais mis l'inverse pour ces 2 items ...  enfin https://zupimages.net/viewer.php?id=21/14/6nm4.png ici pas de soucis mais juste le marquage sur l'ordonné il représente quoi ? moi j'avais fait comme si c'était le nombre de cellules qui entrent en apoptose du coup mes réponses étaient toutes justes mais ça me parait bizarre  Merci par avance Quote
Solution Benoiwr Posted April 7, 2021 Solution Posted April 7, 2021 (edited) Salut @Lilou!  1) Tu as raison, c'est 3370 pb.  2) On te dit dans le QCM que le promoteur est "constitutif", c'est-Ă -dire qu'il s'exprime dans tous les tissus, et donc aussi dans la glande mammaire.  3) A :On peut affirmer que cette fixation est indĂ©pendante de Rnd, puisque mĂȘme quand il n'y a pas de Rnd (c'est-Ă -dire les puits oĂč il y a juste la GST, indiquĂ©s par des barres blanches), on dĂ©tecte du STI (0,1~0,2) au fond du puits. C'est donc qu'elle s'y est fixĂ©e sans Rnd, indĂ©pendamment de Rnd. B : Il n'a que les protĂ©ines purifiĂ©es dans les puits, les interactions sont donc forcĂ©ment directes (il n'y a rien Ă part elles !). A et B ne sont pas contradictoires : A montre qu'il existe de toutes façons une fixation de STI (avec ou sans Rnd), et B montre que cette fixation est fortement augmentĂ©e avec Rnd.  4) Tout d'abord oui, s'il y a "+", ça veut dire qu'on a aussi transfectĂ© un siARN dirigĂ© contre DICER, donc il n'y aura pas ou peu de DICER dans la cellule. Quand il y a DICER dans la cellule (6eme colonne), on observe peu d'activitĂ© lucifĂ©rase, donc la lucifĂ©rase a Ă©tĂ© dĂ©gradĂ©e par le shARN Luc. Et quand il n'y a plus DICER dans la cellule (derniĂšre colonne), il y a beaucoup d'activitĂ© lucifĂ©rase, donc la lucifĂ©rase n'a pas Ă©tĂ© dĂ©gradĂ©e pour le shARN Luc (qui pourtant est prĂ©sent), donc le shARN Luc nĂ©cessite la protĂ©ine DICER pour fonctionner. Donc C vrai. La D est fausse, le siARN Luc induit toujours une baisse d'activitĂ© lucifĂ©rase (avec ou sans DICER), et le shARN induit la mĂȘme chose (mais nĂ©cessite DICER).  5) L'annexine v fitc (AV) permet de dĂ©tecter les phosphatidylsĂ©rines (signe d'apoptose) et l'iodure de propidium (IP) permet de marquer les acides nuclĂ©iques des cellules ayant perdu leur intĂ©gritĂ© membranaires (donc de marquer des cellules mortes). L'ordonnĂ©e te montre le pourcentage de cellules AV+ (apoptotiques) et IP- (encore vivantes ) ; elle montre donc bien le taux de cellules apoptotiques.  (Je ne sais pas si tu avais vu, mais certaines de tes questions avaient dĂ©jĂ leur explication fournie dans la correction du TAT, pense Ă la regarder la prochaine fois tu gagneras du temps haha)  J'espĂšre que j'ai pu t'aider, Bon courage pour la suite !    Edited April 7, 2021 by Benoiwr Lilou 1 Quote
Lilou Posted April 7, 2021 Author Posted April 7, 2021 Il y a 2 heures, Benoiwr a dit : On te dit dans le QCM que le promoteur est "constitutif" Oups j'avais loupĂ© cette info si importante !!  Il y a 2 heures, Benoiwr a dit : donc le shARN Luc nĂ©cessite la protĂ©ine DICER pour fonctionner. Donc C vrai. Beh du coup je ne comprends toujours pas, vu que quand il n'y a pas la DICER c'est Ă ce moment lĂ qu'il y a bcp d'activitĂ© de la luciferase donc  Il y a 2 heures, Benoiwr a dit : (mais nĂ©cessite DICER). bref je ne comprends pas pq elle nĂ©cessite DICER ?? desolĂ©e je suis bĂȘte surement   Il y a 2 heures, Benoiwr a dit : 'espĂšre que j'ai pu t'aider Pour le reste c'est parfait merci bcp !!!! Quote
Benoiwr Posted April 7, 2021 Posted April 7, 2021 il y a une heure, Lilou a dit : Beh du coup je ne comprends toujours pas, vu que quand il n'y a pas la DICER c'est Ă ce moment lĂ qu'il y a bcp d'activitĂ© de la luciferase donc Dans ce QCM on cherche Ă savoir quand le shARN Luc est actif. Le rĂŽle du shARN Luc est d'inhiber l'expression de la lucifĂ©rase (c'est le rĂŽle normal d'un siARN, et on nous dit que le shARN a un effet similaire). Donc si le shARN Luc agit, l'expression de la lucifĂ©rase est inhibĂ©e, donc la lucifĂ©rase prĂ©sente peu ou pas d'activitĂ©. (La lucifĂ©rase est un gĂšne rapporteur ; d'habitude, plus elle a d'activitĂ©, plus l'expression de ce qu'on cherche Ă montrer est forte. Mais ici c'est l'inverse, c'est si elle est inhibĂ©e qu'on sait que le shARN Luc agit.) Donc pour rĂ©pondre Ă Â ta question, quand il n'y a pas DICER, il y a beaucoup d'activitĂ© lucifĂ©rase, oui, mais dans ce cas ça veut dire que le shARN Luc ne fonctionne pas (sinon il aurait inhibĂ© l'activitĂ© lucifĂ©rase). A l'inverse, quand il y a DICER, il y a peu d'activitĂ© lucifĂ©rase, donc le shARN Luc agit bien. DICER est donc nĂ©cessaire au fonctionnement du shARN Luc.  Il y a 1 heure, Lilou a dit : bref je ne comprends pas pq elle nĂ©cessite DICER ?? desolĂ©e je suis bĂȘte surement  Mais non t'es pas bĂȘte haha, si tout Ă©tait facile, il n'y aurait pas de concours  Le pourquoi elle nĂ©cessite DICER n'est pas expliquĂ© dans le QCM, et on en a pas besoin pour rĂ©pondre aux items. Mais de ce que je me souviens des cours de gĂ©nome de Mr Langin, DICER est une protĂ©ine qui aide Ă la maturation ou au rĂŽle des ARN interfĂ©rants, donc je pense que sans DICER le shARN n'est pas opĂ©rationnel.  J'espĂšre que c'est plus clair ! Lilou 1 Quote
Lilou Posted April 7, 2021 Author Posted April 7, 2021 il y a 21 minutes, Benoiwr a dit : Dans ce QCM on cherche à savoir quand le shARN Luc est actif. Le rÎle du shARN Luc est d'inhiber l'expression de la luciférase (c'est le rÎle normal d'un siARN, et on nous dit que le shARN a un effet similaire). Donc si le shARN Luc agit, l'expression de la luciférase est inhibée, donc la luciférase présente peu ou pas d'activité. (La luciférase est un gÚne rapporteur ; d'habitude, plus elle a d'activité, plus l'expression de ce qu'on cherche à montrer est forte. Mais ici c'est l'inverse, c'est si elle est inhibée qu'on sait que le shARN Luc agit.) Donc pour répondre à  ta question, quand il n'y a pas DICER, il y a beaucoup d'activité luciférase, oui, mais dans ce cas ça veut dire que le shARN Luc ne fonctionne pas (sinon il aurait inhibé l'activité luciférase). A l'inverse, quand il y a DICER, il y a peu d'activité luciférase, donc le shARN Luc agit bien. DICER est donc nécessaire au fonctionnement du shARN Luc. Alleluia j'ai compris !!!!! vraiment merci pour ta patience et ton expli est parfaite  Benoiwr 1 Quote
Benoiwr Posted April 7, 2021 Posted April 7, 2021 (edited) @Lilou De rien avec plaisir ! Edited April 7, 2021 by Benoiwr Quote
Recommended Posts
Join the conversation
You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.
Note: Your post will require moderator approval before it will be visible.