Epitope conformationnel ? How to know that

[Vaiana]

Salut, je comprends pas comment on rep item E

 

Merci  

 

1) 

 

 

 

Merciiiii bcQ  

[dwightkschrute]

Hey @tRARAbajar

Quand en conditions réductrices tu n'observes pas de marquage de PM, tu peux en déduire que l'épitope est conformationnel: 

C'est tout simple: en conditions réductrices tu n'as pas d'épitopes conformationnels que des séquentiels 

Si tu n'observes aucun marquage en conditions réductrices alors tu peux faire l'hypothèse que les épitopes sont conformationnels 

 

J'espère pas avoir dis de bêtises et t'avoir aidé 

[Sarhabdomyocyte]

il y a 45 minutes, dwightkschrute a dit :

Quand en conditions réductrices tu n'observes pas de marquage de PM, tu peux en déduire que l'épitope est conformationnel: 

(je rajoute juste : on observe bien un signal en ELISA, c'est que l'AcmE reconnaît bien P : mais ELISA est non dénaturante, ce qui laisse l'hypothèse d'un épitope conformationnel).

Sinon dans le cas général, si on observe aucun marquage, c'est peut être juste que la protéine n'est pas là mdrrr

 

Et attention ici on est en conditions DENATURANTES, non réductrices, c'est pas la même chose. La dénaturation (le SDS est un dénaturant) déplie les protéines, la réduction (le bêta-mercaptoéthanol est un agent réducteur) coupe les ponts disulfures.

Mais de toute façon oui, si on observe une différence à partir du moment où on dénature ou on réduit, c'est que l'épitope était conformationnel.

 

 

Bon courage  

[Vaiana]

il y a 37 minutes, TutoSarhabdomyocyte a dit :

Mais de toute façon oui, si on observe une différence à partir du moment où on dénature ou on réduit, c'est que l'épitope était conformationnel.

 

 

Coucou ! Alors du coup si j'observe un signal en Elisa, c'est qu'on est en condition dénaturante et à partir de ce moment-là je peux en déduire que oui on est dans le cas d'un épitope conformationnel ? 

 

Merci beaucoup !!  

 

@dwightkschrute Merci beaucoup pour ton aide !  

[Sarhabdomyocyte]

il y a 2 minutes, tRARAbajar a dit :

Coucou ! Alors du coup si j'observe un signal en Elisa, c'est qu'on est en condition dénaturante et à partir de ce moment-là je peux en déduire que oui on est dans le cas d'un épitope conformationnel ? 

 

Justement non, ELISA est une technique non dénaturante, qui donc t'autorise à repérer des épitopes conformationnels ; mais aussi des épitopes séquentiels, s'ils ne sont pas cachés par la conformation native de la protéine.

Ainsi, si par exemple tu es dans le cas où tu obtiens du signal en ELISA mais aucun signal en WB (ce qui est le cas dans ce QCM), ça veut dire que tu obtiens du signal quand l'antigène n'est pas dénaturé mais pas de signal quand il est dénaturé : donc l'intégrité de l'épitope reconnu dépend de la conformation 3D de la protéine, ce qui définit un épitope conformationnel.

 

Si c'est toujours pas clair dis moi, on reprendra les bases.

Bisous  

[Vaiana]

@TutoSarhabdomyocyte J'ai compris, mdrrr merci beaucoup à toi c'est hyper clair