Recherche

[Lilou]

Bonjour, est ce que quelqu'un pourrait m'expliquer ces 2 items svp ?

 

1. Les enzymes Cla I 5’ AT/CGAT 3’ et Taq I 5’ T/CGA 3’ sont des isocaudomères.

1. Vous pourrez insérer un ADNc possédant un site de restriction Sau3 A1 5’/GATC 3’ à

   chacune de ses extrémités dans un plasmide possédant un MCS renfermant des sites

   BspDI 5’ AT/CGAT 3’, Xho I 5’C/TCGAG 3’ et BglII 5’ A/GATCT 3’.

 

Ils sont vrais tout les 2. Merci par avance 

[Charette]

Salut !

 

1) Des isocaudomères sont des enzymes qui n'ont pas exactement la même "séquence de coupage", mais dont les extrémités libres qui ressortent de cette coupure sont compatibles.

Dans cet exemple :

• Cla I coupe les séquences 5' AT/CGAT 3', donc il restera comme extrémité libre 5' CG 3'
• Taq I coupe les séquences 5' T/CGA 3', donc il restera comme extrémité libre 5' CG 3'

--> Ces deux extrémités générées par ces enzymes sont compatibles entre elles, ces deux enzymes sont donc des isocaudomères.

 

2) L'ADNc est coupé par l'enzyme Sau3 A1 qui coupe en 5' /GATC 3', les extrémités générées seront donc 5' GATC 3'. En ce qui concerne le plasmide, son MCS possède 3 sites de coupure pour les enzymes de restriction :

• Pour BspDI, qui coupe en 5' AT/CGAT 3', générant les extrémités libres 5' CG 3' --> non compatible avec l'ADNc
• Pour Xho I, qui coupe en 5' C/TCGAG 3', générant les extrémités libres 5' TCGA 3' --> non compatible avec l'ADNc
• Pour BglII, qui coupe en 5' A/GATCT 3', générant les extrémités libres 5' GATC 3' --> compatible avec l'ADNc

[Lilou]

C'est super, j'ai compris merci bcp pour la 1

Il y a 19 heures, Charette a dit :

2) L'ADNc est coupé par l'enzyme Sau3 A1 qui coupe en 5' /GATC 3', les extrémités générées seront donc 5' GATC 3'. En ce qui concerne le plasmide, son MCS possède 3 sites de coupure pour les enzymes de restriction :

• Pour BspDI, qui coupe en 5' AT/CGAT 3', générant les extrémités libres 5' CG 3' --> non compatible avec l'ADNc
• Pour Xho I, qui coupe en 5' C/TCGAG 3', générant les extrémités libres 5' TCGA 3' --> non compatible avec l'ADNc
• Pour BglII, qui coupe en 5' A/GATCT 3', générant les extrémités libres 5' GATC 3' --> compatible avec l'ADNc

Et la justement je ne comprend pas, pour que l'item soit vrai il aurait fallu que les 3 soit compatibles avec l'ADNc non ?

Edited March 4, 2021 by Lilou

[Charette]

Justement la on te demande si on pourra insérer l'ADNc dans un vecteur qui contient ces trois sites de restriction, donc tant que ça marche pour l'un des trois c'est ok !

[Lilou]

Ah okkk je vois merci bcp @Charette