vecteur

[camcam09]

Et bonjour j'ai un petit souci sur l'item E du qcm 5  ( VRAI) je comprends pas comment on trouve 7,4Kdb, d'habitude on insert le le séquence on obtient une taille du vecteur recombinant supérieur au vecteur non recombinant. 

Pouvez-vous m'éclairer 

https://zupimages.net/viewer.php?id=21/06/ufai.png

https://zupimages.net/viewer.php?id=21/06/3myu.png

[vaporr]

heyy alors je suis pas 100% sure de moi mais je vais dire comment je ferais personnellement ^^

En gros je calcule la taille de l'insert quand tu le clive avec Nnn et Kkk: ça me fait (Nnn-Eee) + (Eee-Kkk) = 300 + 400 = 700 pdb. On va donc insérer 700 pdb au vecteur.

Ensuite je calcule la taille de la partie du vecteur qui va être clivée en utilisant les mêmes enzymes de restriction (cad Nnn et Kkk), donc ça te fait (Nnn-Aaa)+ (Aaa-Kkk)= 300 + 1000= 1300 pdb. On va donc enlever ces 1300 pdb.

 

donc tu as clivé 1300 pdb, et tu rajoutes les 700 de l'insert: -1300 + 700 = -600 pdb (tu perds donc 600 pdb)

tu fais donc la taille de ton vecteur - 600 pdb: 8000 - 600 = 7400 pdb

 

En espérant ne pas avoir fait d'erreur et que c'est assez clair!

Edited February 12, 2021 by vaporr

[camcam09]

@vaporr d'accord je pense que ta réflexion est bonne mais moi ce que je comprends pas c'est pourquoi dans le plasmide PiNKD on enlève des pb de Nmm a kkk, normalement on coupe avec ses enzymes de restriction puis on insert le gene d'intérêt. Sans forcement retirer ses fragments 

[ZoeDbg]

@camcam09 Ici tu coupes à deux endroits sur le plasmide donc forcément la partie entre les deux coupures (Nnn et Kkk) va être retirée !

Si jamais tu coupes avec une seule endonucléase à un seul endroit de ton plasmide, le vecteur va se linéariser sans perdre de fragments 

 

Est ce que tu visualises ?  

 

@vaporr a tout bon !

[camcam09]

@ZoeDbgOh yess merciii beaucoup