Vecteurs

[loukoum01]

Hello, alors petite question simple mais pourtant je me trompe à coup sur donc est-ce que vous pourriez m'aider pour l'item E ( vrai) svp ? Un petit schéma serait pas de refus 

merciii

[E182]

Il manque le début de l'énoncé qui te permet de répondre, c'est un question de complémentarité des bases (données dans l'énoncé principal) il me semble

[Hypnos]

1 hour ago, loukoum01 said:

Hello, alors petite question simple mais pourtant je me trompe à coup sur donc est-ce que vous pourriez m'aider pour l'item E ( vrai) svp ? Un petit schéma serait pas de refus 

merciii

Salut

 

alors on est dans la situation où on digére le plasmide et l’ADNc avec l’enzyme de restriction jak

vu qu’on a tout nos bouts qui sont digérés par la même enzyme, on fait une transgenese non orienté. Ainsi, elle peut l’insert peut se mettre dans les deux sens, l’un bon avec le cordon initiateur du côté du promoteur, et l’autre à l’envers.

 

pour vérifier que le plasmide est ok, ce qu’il faut faire c’est le digérer par Tom pour voir s’il est dans le bon sens

 

si Dans le bon sens, après digestion on obtient deux bouts : un de 1600kb et un autre de 3200kb

si dans le mauvais sens : on obtient un de 1200kb et un de 3600kb

 

c’est plus clair ?

[loukoum01]

Merci pour les réponses mais en fait ce que je comprends pas c'est comment on trouve 1600 et 3200pb?

[camcam09]

Coucou @loukoum01 alors si tu rajoutes l'ADNc coupé par jack tu obtient un plasmide recombiné de 5Kb, pour obtenir le fragment dans le mauvais sens il suffit d'inverser le sens de l'ADNc . Ainsi le codon stop sera a cote du promoteur et le codon initiateur a cote du terminateur donc il ne pourra pas y avoir traduction, mais la transcription reste tout de même possible. Donc lorsque l'on va être dans le mauvais sens on va couper l'ADNc avec jack donc le 600 pb puis le 200 pb vue que c'est inverser donc dans le plasmide recombiné il va être intégré donc on aura bien 1600 et 3200.

Edited February 1, 2021 by camcam09

[PierrickSenior]

Je plussoie les dires @camcam09, si jamais ça te suffit pas j'essaierai d'exposer les choses différemment. 

 

Bonne journée.

[loukoum01]

Okay merci à vous tous ! Merci à @camcam09 tié le 100