ImmunoAnalyse, breféldine A et Ionomycine

[Odontoboulot]

Bonjour, j'ai un peu de mal à comprendre cette partie du cours, le but c'est de doser l'IFNy ?

quelqu'un pourrait m'expliquer les étapes  SVP, je cite " 

 

Marquage d’Ag membranaires (CD4 et CD8) et d’Ag intracellulaires (cytokine: IFNg)

(i) Stimulation polyclonale (4h) (PMA/ionomycine + bréfeldine A)

(ii) Marquage anti-CD4+anti-CD8

(iii) Fixation/perméabilisation +anti-IFNg  "

 

Merci d'avance 

 

[Provencal_le_gaulois]

hey @Odontologie

euuuuh là j'avoue je sèche... c'est tiré de quel cours ?

[Odontoboulot]

il y a 1 minute, Provencal_le_gaulois a dit :

hey @Odontologie

euuuuh là j'avoue je sèche... c'est tiré de quel cours ?

 

Salut, c'est notre cours du Pr Segui sur l'immunoAnalyse

[Soleilne]

Il y a 2 heures, Odontologie a dit :

(i) Stimulation polyclonale (4h) (PMA/ionomycine + bréfeldine A)

(ii) Marquage anti-CD4+anti-CD8

(iii) Fixation/perméabilisation +anti-IFNg  "

i -> tu stimules tes Lymphocytes T pour qu'il fasse des cytokines Infg avec la ionomycine, et la bréfeldine A les empêchent de les sécreter (du coup ils restent dans les LT)

ii-> tu marques tes LT avec des anticorps anti CD4 et anti CD8 

iii-> tu fixes tes LT et tu les perméabilises pour que les molécules (je dis ça parce que je sais pas si c'est des anticorps) anti-IFNg aillent se fixer sur les cytokines bloqués à l'intérieur de ton LT

et le but c'est de voir quels LT font le plus de IFNg je dirais mais pas sûr de ce que j'avance

Edited January 26, 2021 by Soleilne

[Odontoboulot]

il y a 3 minutes, Soleilne a dit :

i -> tu stimules tes Lymphocytes T pour qu'il fasse descytokines Infg avec la ionomycine, et la bréfeldine A les empêchent de les sécreter (du coup ils restent dans les LT)

ii-> tu marques tes LT avec des anticorps anti CD4 et anti CD8 

iii-> tu fixes tes LT et tu les perméabilises pour que les molécules (je dis ça parce que je sais pas si c'est des anticorps) anti-IFNg aillent se fixer sur les cytokines bloqués à l'intérieur de ton LT

et le but c'est de voir quels anticorps font le plus de IFNg je dirais mais pas sûr de ce que j'avance

 

Salut, Super Merci beaucoup !