homogenat tampon de lyse

[la_jadénosine]

bonjour, je crois que je n'ai pas bien compris la difference entre homogenant et extrait brut ? 

de plus, je n'ai pas tres bien compris apres un tampon de lyse qu'est ce qui allait dans le culot et qu'est ce qui était la fraction soluble et le surnageant

Edited January 24, 2021 by la_jadénosine

[mayack]

Coucou, 

Alors l'homogénat c'est ce que t'obtiens après la lyse cellulaire (après éclatement des cellules), puis tu centrifuge (pour éliminer les débris cellulaires) et t'obtient un extrait avec plusieurs protéines dont ta protéine d'intérêt. 

Quand tu mets un tampon de lyser, le but c'est ... de lyser (tu trouvera dedans pleins de composés comme des détergents, des solutions tampons, des anti protéases, des dnases, rnases, en tout cas la composition dépend de ce que tu veux extraire) puis tu centrifuge et tu aura dans le culot: les débris cellulaire et dans le surnageant tes protéines (c'est normalement la fraction soluble) 

[unepaces]

Il y a 1 heure, la_jadénosine a dit :

bonjour, je crois que je n'ai pas bien compris la difference entre homogenant et extrait brut ? 

de plus, je n'ai pas tres bien compris apres un tampon de lyse qu'est ce qui allait dans le culot et qu'est ce qui était la fraction soluble et le surnageant

Bonjour! un homogénat est constitué des cellules éclatés, protéines etc , l'extrait brut lui est une solution dans laquelle y'a plus de débris ni acides nucléiques!

 

Apres le tampon de lyse on obtient une fraction soluble, le surnageant, avec les protéines d'intérêt, et d'un autre coté on a le culot qui est une fraction précipité insoluble avec les organites notamment

[Paul__onium]

Bon je fais un mixte des réponses de@unepaces et @mayack qui s'étoffent entre elles pour cloturer le sujet.

 

il y a 26 minutes, mayack a dit :

Coucou, 

Alors l'homogénat c'est ce que t'obtiens après la lyse cellulaire (après éclatement des cellules), puis tu centrifuge (pour éliminer les débris cellulaires) et t'obtient un extrait avec plusieurs protéines dont ta protéine d'intérêt. 

Quand tu mets un tampon de lyser, le but c'est ... de lyser (tu trouvera dedans pleins de composés comme des détergents, des solutions tampons, des anti protéases, des dnases, rnases, en tout cas la composition dépend de ce que tu veux extraire) puis tu centrifuge et tu aura dans le culot: les débris cellulaire et dans le surnageant tes protéines (c'est normalement la fraction soluble) 

 

il y a 24 minutes, unepaces a dit :

Bonjour! un homogénat est constitué des cellules éclatés, protéines etc , l'extrait brut lui est une solution dans laquelle y'a plus de débris ni acides nucléiques!

 

Apres le tampon de lyse on obtient une fraction soluble, le surnageant, avec les protéines d'intérêt, et d'un autre coté on a le culot qui est une fraction précipité insoluble avec les organites notamment