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Élution par palier


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Posted (edited)

Bonjour! Dans un qcm du TAT, il y a un item qui me pose problème

"A. En utilisant la méthode d’élution par palier, il y aura une modification progressive de la solution d’élution."

Compté faux et la justification est  

"La modification progressive de la solution se retrouve dans le cas d’une élution par gradient."

Du coup ma question est: c'est quoi la différence entre élution par gradient et par palier ??

Et j'ai une autre question, le KO d'un gène se fait bien par recombinaison non-homologue ?

Merci beaucoup d'avance !! 😄

Edited by Emma06
Posted

Bonjour @Emma06,  l'élution par gradient est comme l'item l'indique, une modification progressive de la solution d'élution. En revanche lors de l'élution par palier, la modification de la solution d'élution n'est pas progressive, la modification de la phase mobile se fait par palier donc avec des écarts de concentrations supérieurs, et bien marqués comparé à l'élution par gradient. 

 

Dans la diapo 72, du Pr COUDERC, tu pourras voir que le KO se fait bien par recombinaison homologue. 

 

En espérant avoir répondu à tes questions, bonne soirée !!

  • Solution
Posted

Salut 🙂 

 

Alors, si je reprends purement la définition qu'on te donne dans le poly du tat on a: 

 

"L'élution peut se faire par palier lorsqu’on ajoute d’un coup une seule solution d’élution qui fait sortir toutes les protéines en même temps.

Elle se fait aussi par gradient si on augmente progressivement la concentration en solution d’élution, on sépare alors les différentes protéines selon leur affinité pour la colonne car elles sortent à des moments différents."

 

image.png.404aa8c7f16efbc6b9236c776bc8f7fa.png

 

Ici tu as un bon exemple d'élution progressive. La concentration de NaCl augmente et petit à petit les molécules sortent. 

 

image.png.6ca5ea094542aee1408b152d22bf44f3.png

 

Ici tu as une élution par palier. Tu vois bien qu'on met toute la solution d'un coup qui fait sortir toutes les molécules en 1 pic. 

 

 

Pour la question du KO selon la diapo du cours oui ^^

image.png.65ec42bfc5f6a388731ec515b1cb0765.png

 

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