REVERSE TRANSCRIPTION

[clem_31]

QCM 27. Afin de savoir si la protéine A est un facteur de transcription, les chercheurs l’ont rajoutée à différentes concentrations dans le milieu de culture de cellules humaines. 30 mn après les cellules ont été lysées et les ARN ont été extraits et purifiés. Une analyse par RT- PCR et gel d’électrophorèse a été réalisée. Pour la PCR, ils ont utilisé deux couples d’amorces, un couple permet l’amplification d’un gène X dont l’expression est inductible et l’autre couple un gène domestique. Le schéma du gel d’électrophorèse révélé sous les UV après coloration SYBR green est présenté ci-dessous. Indiquez le caractère vrai ou faux des propositions suivantes :

A. La protéine A est un facteur cis régulateur
B. Une reverse transcription a été nécessaire
C. La protéine A possède un effet activateur de la transcription sauf à la concentration de 100nM
D. Les gènes domestiques sont exprimés de façon ubiquitaire dans les différents tissus E. Les ARNm ont pu être isolés grâce à une chromatographie d’affinité

à l’instant, clem_31 a dit :

QCM 27. Afin de savoir si la protéine A est un facteur de transcription, les chercheurs l’ont rajoutée à différentes concentrations dans le milieu de culture de cellules humaines. 30 mn après les cellules ont été lysées et les ARN ont été extraits et purifiés. Une analyse par RT- PCR et gel d’électrophorèse a été réalisée. Pour la PCR, ils ont utilisé deux couples d’amorces, un couple permet l’amplification d’un gène X dont l’expression est inductible et l’autre couple un gène domestique. Le schéma du gel d’électrophorèse révélé sous les UV après coloration SYBR green est présenté ci-dessous. Indiquez le caractère vrai ou faux des propositions suivantes :

A. La protéine A est un facteur cis régulateur
B. Une reverse transcription a été nécessaire
C. La protéine A possède un effet activateur de la transcription sauf à la concentration de 100nM
D. Les gènes domestiques sont exprimés de façon ubiquitaire dans les différents tissus E. Les ARNm ont pu être isolés grâce à une chromatographie d’affinité

omment C savoir pour la reverse transcription ???

 

[audales]

bonsoir, 

 

tu réalises ici une RT - PCR -> le RT est justement pour reverse transcription ! en effet, tu dois transformer ton ARN en ADN pour le stabiliser et réaliser ton amplification par PCR