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Bonsoir,

 

Pour l'item A de l'exo en pj (concours blanc tutorat Rangueil sujet 2), le problème est bien que si j'insère le vecteur dans le mauvais sens le codon stop sera coté promoteur et donc pas de transcription possible?

 

Merci d'avance

 

Marion

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Hola,

Ta diapo est un peu floue mais de ce que j'ai cru voir :

 

En coupant le plasmide avec cet enzyme, tu as bien la bonne ouverture, avec (sûrement) des bouts cohésifs et pas francs.

 

Du coup pour insérer ton adnc, il faudra le couper de facon à avoir des bouts cohésifs compatibles avec les bouts cohésifs de ton enzyme, or tu n'as pas ça en ne touchant pas à ton ADNc.

 

Voila, j'espere que ca repond a ta question =)

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Je n'arrive pas à charger le document qui est trop gros je pense.

Le bout d'adn possède 2 extrémités cohésives (sgf1). Le plasmide possède aussi un site de restriction Sgf1, donc niveau insertion ça devrait coller.

Je pense que comme on veut qu'il y ait transcription du fragment aprés insertion dans 100 % des cas, il faut Que le AUG du vecteur soit dans le bon sens et donc choisir 2 enzymes pour forcer le bon sens

Merci d'avoir pris le temps de répondre.

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