le phi

[lbelkacem]

coucou,  je viens vers vous pour avoir de l'aide concernant le Phi le PKa et tout je n'ai vraiment pas compris comment on le calcule ni son principe et surtout comment ç fonctionne avec la chromatographie et l'électrophorèse si qlq peut m'expliquer ça serait génial merci beaucoup.

[Julyse]

Salut @lbelkacem

 

Le pHi c'est le pH isoélectrique, c'est à dire que c'est le pH pour lequel la molécule a une charge totale nulle.

Pour le calculer voici un sujet super bien détaillé. 

 

Pour la chromatographie échangeuse d'ions: les molécules sont retenues dans la colonne selon leur charge. Or la charge dépend du pH. 

Si pH <pHi, la molécule est chargée positivement 

Si le pH> pHi , la molécule est chargée négativement. 

Si pH = pHi, la molécule est neutre. 

 

Donc ensuite, une chromatographie échangeuse de cations a une résine négative donc elle retient les molécules chargée positivement. 

Une chromato échangeuse d'anions a une résine positive donc elle retient les molécules négatives. 

Une molécule neutre n'est pas retenue dans la chromatographie échangeuse d'ions. 

 

L'électrophorèse se fait avec du SDS-PAGE donc toutes les molécules sont chargées négativement (peut importe leur pHi) et vont migrer vers le pôle positif selon leur poids moléculaire uniquement.  

 

Bon courage !