Taq polymérase

[nell-de-poule]

Salut, j'ai du mal à comprendre ce qu'est la Taq polymérase dans le cours des techniques de M levade. J'ai vu qu'on l'a mettait pour faire de la PCR, mais j'ai pas bien compris son rôle, quelqu'un pourrait m'éclairsir?  Merciiii

[SBY]

Salut @nell-de-poule !

 

En fait quand on fait une PCR, l'hybridation des amorces se fait à un température de 60°C. On a en plus besoin de dénaturer l'ADN pour justement que les amorces puissent se fixer donc on sera à des températures très élevées (94°C). Or, les ADN polymérases ''normales'' de la réplication sont actives à 37°C (température physiologique) ce qui rendrait donc la PCR impossible, si on travaillait à une telle température, puisqu'on ne pourrait pas amplifier le fragment vu que l'ADN se refermerait et que les amorces ne pourraient pas se fixer. De plus, à des températures très élevées ces ADN polymérases se dénaturent et deviennent donc inutilisables. 

 

On va donc utiliser une Taq Polymérase qui est en fait une ADN polymérase bactérienne thermostable, capable de résister à de hautes températures telle que 94°C, température de dénaturation des brins. Elle pourra synthétiser l'ADN à 72°C. 

 

Par contre, cette Taq polymérase n'est pas de très grande fidélité donc si on recherche une mutation avec une seule base mutée par exemple, on va pas vraiment l'utiliser, et on privilégiera une autre ADN polymérase plus précise. 

 

J'espère que c'est plus clair. 

Bonne journée !

[nell-de-poule]

@SBY plus clair y'a pas, merci ta réponse est au top! Bonne journée à toi

[SBY]

Avec plaisir ! 

[Liliputienne]

Bop c'est parfait @SBY