lacelluledu66 Posted November 13, 2020 Posted November 13, 2020 Bonjour! 1. est-ce qqn peut m'expliquer pourquoi on ne peut pas prouver que deux molécules interagissent dans une cellule en montrant leur colocalisation avec des anticorps marqués par des fluorochromes différents? svp 2. est-ce que le FISH (fluorescence in situ hybridization) peut se réalisé uniquement sur chromosome métaphasique et sur des cellules en interphase? si oui, pourquoi? svp 3. pourquoi si la sonde est marquée avec des nucléotides radioactifs, la visualisation passera obligatoirement par une étape d'autoradiographie? c'est quoi l'autoradiographie? svp MERCIII Quote
Solution Darsalade Posted November 13, 2020 Solution Posted November 13, 2020 (edited) Re coucou ! Il y a 2 heures, Larab a dit : 1. est-ce qqn peut m'expliquer pourquoi on ne peut pas prouver que deux molécules interagissent dans une cellule en montrant leur colocalisation avec des anticorps marqués par des fluorochromes différents? svp Parce que 2 molécules peuvent être localisés au même endroit, mais ça ne veux pas forcément dire qu'elles interagissent ensemble, donc les anticorps marqués par des fluorochromes différents montre seulement leur colocalisation mais pas leur interactions Il y a 2 heures, Larab a dit : 2. est-ce que le FISH (fluorescence in situ hybridization) peut se réalisé uniquement sur chromosome métaphasique et sur des cellules en interphase? si oui, pourquoi? svp Dans le cadre de votre cours il faut retenir que la technique FISH se fait seulement en métaphase (car condensation maximale des chromatines atteinte) et en interphase Si d'autres tutowebiens ont une explication plus précise n'hésitez pas à intervenir (Mais ça sera pour la culture G) Il y a 2 heures, Larab a dit : 3. pourquoi si la sonde est marquée avec des nucléotides radioactifs, la visualisation passera obligatoirement par une étape d'autoradiographie? c'est quoi l'autoradiographie? svp La visualisation doit passer par l'autoradiographie, c'est une technique qui va jouer sur le rayonnement des particules radioactifs pour agir sur des film photographiques argentique Des réactions vont se produire mettant en jeu des électrons pour donner une empreinte avec des points noirs sur le film radiographie là où les éléments radioactifs seront détectés Ainsi il est possible de détecter la présence des sondes chaudes lors de l'hybridations in situ et savoir si il y'a eu détection ou non de la séquence recherchée Bon courage pour tes révisions !! Edited November 13, 2020 by Darsalade Quote
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