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Hexamères aléatoires


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Bonsoir !

 

A quoi vont servir les brins synthétisés marqués ?

Les amorces sont-elles marquées ou seulement les brins synthétisés le sont (car substrats = dNTP marqués) ?

 

Merci 🙂

Posted

Coucou !!

il y a une heure, Emmacarena a dit :

Dans quel cours tu te réfères ? 

C'est sur le cours des techniques, quand on utilise plein d'amorces différentes (toutes les combinaisons possibles avec 6 Nt)

  • Ancien Responsable Matière
  • Solution
Posted

En fait quand tu utilises les hexamètre aléatoires le but c'est de marquer les sondes.

 

Tout d'abord il faut chauffer le DNA double brin pour séparer les brins (plus la température est élevée et plus la stringence est forte). Ensuite il faut ajouter les fameuses amorces d'hexamètres aléatoires (qui ne sont pas marquées attention ! Ce sont uniquement les points de départ pour lancer la DNA polymérase !). Pour continuer il faut ajouter dans le mélange des dNTP (substrats de DNA polymérase I qui eux sont bien marqués puisqu'on veut obtenir un hybride marqué !). 

 

Le principe ici, c'est du fait de la grande variabilité des amorces, l'hybridation n'est jamais la même selon le type d'amorce sélectionné : c'est ce qu'on appelle du multiamorçage

 

C'est plus clair pour toi ? ☺️

  • Ancien Responsable Matière
Posted

T'as bien fais d'up le sujet 💛

 

Il y a 10 heures, OxyGenS a dit :

on se sert des brins néo-synthétisés marqués comme amorces marquées pour d'autres expériences ?

Les brins néosynthétisés sont ce qui te sert de sonde pour étudier le DNA par exemple ! 

Posted
il y a 5 minutes, Emmacarena a dit :

Les brins néosynthétisés sont ce qui te sert de sonde pour étudier le DNA par exemple ! 

Parfait merci bcp !!

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