OxyGenS Posted November 7, 2020 Posted November 7, 2020 Bonsoir ! A quoi vont servir les brins synthétisés marqués ? Les amorces sont-elles marquées ou seulement les brins synthétisés le sont (car substrats = dNTP marqués) ? Merci Quote
Ancien Responsable Matière Liliputienne Posted November 8, 2020 Ancien Responsable Matière Posted November 8, 2020 Coucou toi @OxyGenS Dans quel cours tu te réfères ? Quote
OxyGenS Posted November 8, 2020 Author Posted November 8, 2020 Coucou !! On 11/8/2020 at 1:56 PM, Emmacarena said: Dans quel cours tu te réfères ? Expand C'est sur le cours des techniques, quand on utilise plein d'amorces différentes (toutes les combinaisons possibles avec 6 Nt) Quote
Ancien Responsable Matière Solution Liliputienne Posted November 8, 2020 Ancien Responsable Matière Solution Posted November 8, 2020 En fait quand tu utilises les hexamètre aléatoires le but c'est de marquer les sondes. Tout d'abord il faut chauffer le DNA double brin pour séparer les brins (plus la température est élevée et plus la stringence est forte). Ensuite il faut ajouter les fameuses amorces d'hexamètres aléatoires (qui ne sont pas marquées attention ! Ce sont uniquement les points de départ pour lancer la DNA polymérase !). Pour continuer il faut ajouter dans le mélange des dNTP (substrats de DNA polymérase I qui eux sont bien marqués puisqu'on veut obtenir un hybride marqué !). Le principe ici, c'est du fait de la grande variabilité des amorces, l'hybridation n'est jamais la même selon le type d'amorce sélectionné : c'est ce qu'on appelle du multiamorçage. C'est plus clair pour toi ? Quote
OxyGenS Posted November 9, 2020 Author Posted November 9, 2020 @Emmacarena et après on se sert des brins néo-synthétisés marqués comme amorces marquées pour d'autres expériences ? Quote
Ancien Responsable Matière Liliputienne Posted November 9, 2020 Ancien Responsable Matière Posted November 9, 2020 T'as bien fais d'up le sujet On 11/9/2020 at 7:15 AM, OxyGenS said: on se sert des brins néo-synthétisés marqués comme amorces marquées pour d'autres expériences ? Expand Les brins néosynthétisés sont ce qui te sert de sonde pour étudier le DNA par exemple ! Quote
OxyGenS Posted November 9, 2020 Author Posted November 9, 2020 On 11/9/2020 at 5:42 PM, Emmacarena said: Les brins néosynthétisés sont ce qui te sert de sonde pour étudier le DNA par exemple ! Expand Parfait merci bcp !! Quote
Ancien Responsable Matière Liliputienne Posted November 9, 2020 Ancien Responsable Matière Posted November 9, 2020 Avec plaisiiir ! Quote
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