Enzyme, et SDS PAGE

[Odontoboulot]

Bonjour, par rapport à ce graphique

 

 

 

La GADPH étant l'enzyme, somme-nous d'accord que A est un activateur, et B un inhibiteur ?

 

Du coup, on voit bien que le Km est différent pour chaque courbe tandis que vmax/2 est identique  :   peut-on en conclure que A et B sont allostériques (non compétiteurs) ?

 

Et autre question : dans le QCM

D. B a un effet allostérique capable de modifier la V max du GAPDH.

D. Attention ! L'effet allostérique ne modifie en rien la V max .

 

 

Pourtant, c'est marqué noir sur blanc dans le diapo du cours que pour un inhibiteur non compétitif, la vmax est diminuée.

 

 

Enfin, pour l'électrophorèse avec le SDS PAGE, je ne suis pas sûr d'avoir bien compris le principe : on charge d'abord les AA, puis on rajoute ce fameux gel SDS ?

 

Donc les AA vont migrer de gauche à droite en fonction de la charge, et de haut en bas en fonction du poids ?

 

 

Merci.

[Cléclé8]

Salut! 

 

Attention il ne faut pas confondre 

*La cinétique Michaélienne:  les inhibiteurs se fixent au même site que le substrat (donc il y a une compétition de fixation) 

un inhibiteur compétitif --> modifie le Km mais pas Vmax

un inhibiteur non compétitif --> modifie Vmax mais pas le Km

* La cinétique non Michaélienne = allostérie : les ensymes allostériques  ne se fixent pas sur le même site que le substrat

--> la Vmax reste la même, seul le Km change, les inhibiteurs décalent la courbe vers la droite et les activateurs déplacent la courbe vers la gauche.

 

Selon la cinétique michaélienne ou non les profils de courbe sont différents. 

*Cinétique michaélienne:

*Allostérie: courbe sigmoïde (aspect en S) comme sur ta photo.

Donc A est bien un activateur car il déplace la courbe vers la gauche et du coup B est un inhibiteur car il déplace la courbe vers la droite.

Le prof ne précise pas dans le cas de l'allostérie si c'est compétitif ou non compétitif donc pour moi on parle de compétition que dans la cinétique michaélienne.

C'est vrai l'allostérie ne modifie pas la Vmax.

 

Pour l'électrophorèse:

Avec le SDS Page on dénature les protéines, elles deviennent toutes négatives. Donc on ne peut plus les séparer selon leur charge.

Cette technique permet de séparer les protéines selon leur masse moléculaire. Plus elles vont loin sur le gel moins elles sont lourdes.

Edited November 4, 2020 by Cléclé8