Diverses questions

[Clooo]

Bonjour, j'ai du mal avec les modifications génétiques possibles tel que les gains de fonction ou les pertes de fonctions

Par exemple je ne sais pas avec quelle méthode de la transgenèse classique, mutagenèse dirigée ou de la transgenèse conditionnelle on utilise pour faire un KO, l'introduction d'un ARN anti-sens, l'ablation génétique, l'expression d'un dominant négatif ou bien augmenter l'expression d'un gène.

Merci d'avance !

[Metallica]

Salut salut

 

Il y a 4 heures, Clooo a dit :

pour faire un KO

 

Alors pour un KO dans un tissu ---> CRE-LOX  pour un KO dans l'organisme tout entier ---> mutagenèse dirigée ( + croisement des individus hétérozygotes transgéniques pour obtenir le KO)

 

Il y a 4 heures, Clooo a dit :

l'introduction d'un ARN anti-sens,

 

mutagenèse additionnelle/aléatoire (pour insérer le cdna codant pour l'ARNm anti-sens) :))

 

Il y a 4 heures, Clooo a dit :

l'expression d'un dominant négatif

 

Là j'imagine que c'est par mutagenèse dirigée vu que l'on veut altérer la structure d'un allèle pour qu'ensuite la protéine altérée qui en découlera inhibe l'expression de l'autre allèle (y a certainement d'autres moyens de le faire mais avec les techniques présentées dans le cours je ne vois que celle-ci)

 

Il y a 4 heures, Clooo a dit :

u bien augmenter l'expression d'un gène.

 

Mutagenèse additionnelle/aléatoire++++

 

Il y a 4 heures, Clooo a dit :

l'ablation génétique

 

Et pour obtenir l'ablation génique cas un gène suicide , je dirai qu'il faut logiquement passer par une mutagenèse aléatoire/additionnelle

 

Je sais pas si ça t'aide

 

J'imagine que tu poses ces questions par rapport à l'annale Rangueil 2016 non ?

[Clooo]

Oui j'ai fait l'annale de Rangueil de 2016 et je ne comprends absolument pas le QCM8 je n'arrive pas à visualiser ce que les techniques pourraient donner et si elles mèneraient à un état hétérozygotes ou homozygotes.

[Metallica]

Le 10/06/2020 à 11:42, Clooo a dit :

Oui j'ai fait l'annale de Rangueil de 2016 et je ne comprends absolument pas le QCM8 je n'arrive pas à visualiser ce que les techniques pourraient donner et si elles mèneraient à un état hétérozygotes ou homozygotes.

 

Ok alors alors :

 

A)

 

B)Un gène suicide tue la cellule donc aucun intérêt ^^

 

C) La construction anti-sens s'attaque aux produits du gène et non pas directement au gène donc on ne peut pas parler d'invalidation ^^ (et c'est doublement faux en plus parce qu'en n'injectant cette construction uniquement dans les FMSS on n'invalidera pas la souris qui reçoit l'injection et on ne transmettra pas ce caractère à la génération suivante) 

 

D) Si on enlève le promoteur --> pas de surexpression tout simplement (et en plus les recombinaisons homologues sont pas trop taillées pour induire des surexpressions de gène mais plus tôt des inactivations)

 

E) Oui c'est vrai, si on rajoute des copies de gène (ou qu'on insère un gène nouveau) pourvu d'un promoteur tissu-spécifique par insertion aléatoire (=microinjection dans le pronucleus ) dans un génome , le gène sera logiquement surexprimé dans le tissu capable d'activer le promoteur du gène ^^