R2016 QCM 4

[EmmaTOM]

Saluuut, j'aurais juste 1 petite question (oui oui une seule) 

Je crois que c'est une question bête, mais je préfère être sur de comprendre

 

https://tutoweb.org/tat_librairie/Rangueil/Annales de Concours/2015-2016/S2/UE8 Recherche.pdf
 

Je ne comprend pas la 4 D  

Merci d'avance  

[special_agent]

Coucou @LucileMacBernik (pas de question bête ) alors tout est ok puisque la protéine est membranaire comme le dit l'ennoncé du coup on pourra la voir avec l'anticorp aproprié en Cell Elisa à condition qu'elle soit exprimée ^^
 

[Metallica]

Re

 

Dans l'énoncé il est dit que l'on a un marquage en immunofluroesence indirecte sur les cellules de la lignée (AQP4+) et ça s'apparent bien à du celle-elisa ^^

[EmmaTOM]

  On 6/3/2020 at 4:54 PM, special_agent said:

tout est ok puisque la protéine est membranaire comme le dit l'enoncé du coup on pourra la voir avec l'anticorp aproprié en Cell Elisa à condition qu'elle soit exprimée ^^

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Ahhh oui je vois d'accord  

 

  On 6/3/2020 at 4:55 PM, Metallica said:

immunofluroesence indirecte

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c'est comme le Cell Elisa? 

 

 

[Ratus]

  On 6/4/2020 at 10:39 AM, LucileMacBernik said:

c'est comme le Cell Elisa? 

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Que veux tu dire par là? On peut se servir d’immunofluorescence indirecte pour faire du Cell ELISA, mais les deux choses ne sont pas identiques non.

[EmmaTOM]

  On 6/4/2020 at 12:31 PM, Ratus said:

Que veux tu dire par là? 

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HUM bah je sais pas vraiment   

 

  On 6/4/2020 at 12:31 PM, Ratus said:

On peut se servir d’immunofluorescence indirecte pour faire du Cell ELISA

Expand  

Est ce que tu peux m'expliquer ça ?

[Ratus]

  On 6/4/2020 at 1:13 PM, LucileMacBernik said:

  On 6/4/2020 at 12:31 PM, Ratus said:

On peut se servir d’immunofluorescence indirecte pour faire du Cell ELISA

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Est ce que tu peux m'expliquer ça ?

Expand  

L'immunofluorescence indirecte, c'est le fait de prendre deux Ac, le premier dit primaire et le second secondaire, et de faire interagir l'Ac primaire avec l'Ag d'intérêt, puis de faire réagir l'Ac secondaire avec l'Ac primaire en ayant préalablement accroché à l'Ac secondaire un un fluorochrome, ce qui in fine permettra de révéler l'ensemble de la structure, donc l'Ag d'intérêt.

Le Cell ELISA, c'est (grossièrement) le fait de reconnaitre des protéines à la surface d'une cellule. Pour ce faire on peut utiliser l'immunofluorescence indirecte, mais ce n'est pas la seule situation dans laquelle on utilise l'immunofluorescence indirecte !

[EmmaTOM]

  On 6/4/2020 at 2:43 PM, Ratus said:

Le Cell ELISA, c'est (grossièrement) le fait de reconnaitre des protéines à la surface d'une cellule. Pour ce faire on peut utiliser l'immunofluorescence indirecte, mais ce n'est pas la seule situation dans laquelle on utilise l'immunofluorescence indirecte !

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Aaaaah en gros, c'est une des méthodes du Cell Elisa c'est ça? Mais pas que 

[Ratus]

  On 6/4/2020 at 4:46 PM, LucileMacBernik said:

Aaaaah en gros, c'est une des méthodes du Cell Elisa c'est ça? Mais pas que 

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Oui! Et inversement on utilise aussi l'immunofluorescence indirecte pour d'autres choses.

[zizou-]

salut @Ratus @Metallica, désolé je reviens sur ce sujet mais j'ai beugé sur le fait que l'AQP4 soit transmembranaire... je croyais que le cell elisa c'était seulement pour les protéines de surface..

[Metallica]

  On 6/8/2020 at 3:18 PM, zizou- said:

l'AQP4 soit transmembranaire... je croyais que le cell elisa c'était seulement pour les protéines de surface..

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AQP4 est transmembranaire et elle comporte un domaine extracellulaire qui pourra faire l'objet d'un ELIScell ;))

[zizou-]

  On 6/8/2020 at 3:23 PM, Metallica said:

AQP4 est transmembranaire et elle comporte un domaine extracellulaire qui pourra faire l'objet d'un ELIScell ;))

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yess mais donc on est pas obligé de détecter toute la protéine pour pouvoir faire le cellElisa ? 

et comment on peut être sûr que l'épitope reconnu par l'Ac. soit sur le domaine extracellulaire ? 

[Metallica]

  On 6/8/2020 at 3:31 PM, zizou- said:

yess mais donc on est pas obligé de détecter toute la protéine pour pouvoir faire le cellElisa ?

Expand  

 

Ah non seul un (ou quelques) épitope(s) le sera(ont)

 

  On 6/8/2020 at 3:31 PM, zizou- said:

et comment on peut être sûr que l'épitope reconnu par l'Ac. soit sur le domaine extracellulaire ? 

Expand  

 

Certains Ac anti-AQP4 ne seront pas dirigés contre la portion extracellulaire mais comme pour faire cette expérience tu auras récupéré des Ac issus d'un As anti AQP4 (obtenu à partir d'une injection d'AQP4 dans un organisme), parmi eux il y en aura forcément qui reconnaitront la portion extracellulaire et qui permettront de faire un ELIScell

[zizou-]

  On 6/8/2020 at 3:51 PM, Metallica said:

  On 6/8/2020 at 3:31 PM, zizou- said:

yess mais donc on est pas obligé de détecter toute la protéine pour pouvoir faire le cellElisa ?

Expand  

 

Ah non seul un (ou quelques) épitope(s) le sera(ont)

 

  On 6/8/2020 at 3:31 PM, zizou- said:

et comment on peut être sûr que l'épitope reconnu par l'Ac. soit sur le domaine extracellulaire ? 

Expand  

 

Certains Ac anti-AQP4 ne seront pas dirigés contre la portion extracellulaire mais comme pour faire cette expérience tu auras récupéré des Ac issus d'un As anti AQP4 (obtenu à partir d'une injection d'AQP4 dans un organisme), parmi eux il y en aura forcément qui reconnaitront la portion extracellulaire et qui permettront de faire un ELIScell

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ça marche merci +++ à toi  

[Metallica]

Avec plaisir :))