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Linéarisation


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Bonjour! 🙂

Je ne pense pas avoir compris le principe de linéarisation des plasmides: peut-on insérer un ADNc dans un plasmide linéarisé ou non ? Et quelles sont les conditions nécessaires à cette linéarisation (que les deux extrémités ne soit pas compatibles/utilisation de phosphatases alcalines ou pas du tout ?) ?

Aussi, l'immunotransfert ou le Dot-Blot sont-ils utilisables sur les Ag ET les Ac ??

 

Si quelqu'un peut m'aider là dessus c'est pas de refus 😇

  • Solution
Posted

Coucou

il y a 6 minutes, Crillon a dit :

Je ne pense pas avoir compris le principe de linéarisation des plasmides: peut-on insérer un ADNc dans un plasmide linéarisé ou non ?

 

Ouaip 🤠

 

il y a 7 minutes, Crillon a dit :

Et quelles sont les conditions nécessaires à cette linéarisation (que les deux extrémités ne soit pas compatibles/utilisation de phosphatases alcalines ou pas du tout ?) ?

 

Oui les deux sont possibles, si tu utilises deux ER générant deux extrémités non compatibles, le plasmide ne se refermera pas et si tu appliques de la phosphatase alcaline les liaisons phosphodiesters ne pourront pas se faire et là encore le plasmide ne pourra pas se refermer

 

il y a 9 minutes, Crillon a dit :

ussi, l'immunotransfert ou le Dot-Blot sont-ils utilisables sur les Ag ET les Ac ??

 

Yep :)) (les Ac peuvent se comporter comme des Ag)

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