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R2015


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Salut,

 

1) https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/7tau.png

VRAI : BCE

1.1) Déjà je comprends pas pq l'énoncé dit seulement "vous souhaitez disposer de souris transgéniques" ça sous-entend "pour lesquelles le gène g est invalidé" ? Pour moi, tant que c'est pas précisé, on veut juste des souris transgéniques sans plus...

1.2) Le A est faux pcq on n'a pas de promoteur tissu-spécifique ?

1.3) Pour invalider le gène, enlever qques exons est suffisant ?

 

2) https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/03b5.png

https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/e6fq.png

VRAI : BD

2.1) Pour le C, la double sélection fait que toute la séquence est détruite (due à la présence de tk) ?

2.2) Petit doute : G418 c'est la neomycine ?

 

3) https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/0gwn.png

https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/373l.png

VRAI : AE

Pour le C, même si l'item avait dit "létale 24h après", il aurait été faux non ? Pcq les souris hétérozygotes ne meurent pas, pour autant elles présentent aussi la mutation ?

 

4) https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/3kel.png

https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/s5qt.png

VRAI : BD

4.1) Je comprends pas pq le B est vrai.

4.2) La E est fausse pcq BsgI n'a pas de site de restriction sur le plasmide ?

 

Merci

Edited by OxyGenS
  • Solution
Posted

Salut :))

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

1.1) Déjà je comprends pas pq l'énoncé dit seulement "vous souhaitez disposer de souris transgéniques" ça sous-entend "pour lesquelles le gène g est invalidé" ? Pour moi, tant que c'est pas précisé, on veut juste des souris transgéniques sans plus...

Expand  

 

Ben étant donné que cette phrase est rattachée à un gène particulier, ça dit implicitement qu'on va traiter d'une invalidation mais si on avait eu que cette phrase effectivement ça aurait pu ne pas etre le cas

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

.2) Le A est faux pcq on n'a pas de promoteur tissu-spécifique ?

Expand  

 

Du coup dans cet item on cherche bien à obtenir l'invalidation totale du gène g, et si l'on veut y arriver il faut remplacer le gène original par le transgène. Ceci se fera par mutagenèse dirigée (recombinaison homologue) et non pas par insertion aléatoire du transgène (=microinjection dans le pronucléus) qui n'invaliderait pas le gène.

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

1.3) Pour invalider le gène, enlever qques exons est suffisant ?

Expand  

 

ça dépend , normalement l'inactivation c'est faire en sorte de ne plus obtenir de produit génique (protéine), donc la logique voudrait que l'on invalide systématiquement le premier exon contenant l'ATG initiateur mais est ce que le fait d'obtenir une protéine dont certains exons ont été supprimés fait de ceci une invalidation, honnêtement je pense pas

 

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

2.1) Pour le C, la double sélection fait que toute la séquence est détruite (due à la présence de tk) ?

Expand  

 

Oui c'est ça tk et G418 devraient etre inversées (ici ça va provoquer la mort cellulaire)

et deuxième truc qui le rend faux c'est que ça ne touche pas à l'exon 3

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

2.2) Petit doute : G418 c'est la neomycine ?

Expand  

 

Yup

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

Pour le C, même si l'item avait dit "létale 24h après", il aurait été faux non ? Pcq les souris hétérozygotes ne meurent pas, pour autant elles présentent aussi la mutation ?

Expand  

 

Je comprends pas trop ce que tu veux dire, l'item est faux parce que les souris qui ont une activité nulle de la PAH sont les homozygotes, et ces homozygotes ne représentent en moyenne que 25% des souriceaux à chaque portée donc que l'on soit à la naissance ou 24h après la naissance, ce " 50%" sera faux puisque de base on atteint même pas ce 50%

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

4.1) Je comprends pas pq le B est vrai.

Expand  

https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/zbqr.jpg

 

 

  On 5/27/2020 at 4:19 PM, OxyGenS said:

4.2) La E est fausse pcq BsgI n'a pas de site de restriction sur le plasmide ?

Expand  

 

Effectivement de base il n'y a pas de site de restriction pour cette ER sur le plasmide mais vu que l'on réassocie des sites issus de séquences différentes, on pourrait avoir une apparition du site de BsgI mais du coup c'est pas le cas:

 

https://zupimages.net/viewer.php?id=20/22/rvf1.png

 

 

ça te va ? 🤓

 

 

Posted
  On 5/27/2020 at 6:57 PM, Metallica said:

Du coup dans cet item on cherche bien à obtenir l'invalidation totale du gène g, et si l'on veut y arriver il faut remplacer le gène original par le transgène. Ceci se fera par mutagenèse dirigée (recombinaison homologue) et non pas par insertion aléatoire du transgène (=microinjection dans le pronucléus) qui n'invaliderait pas le gène.

Expand  

Il aurait fallu des cellules ES ?

 

  On 5/27/2020 at 6:57 PM, Metallica said:

et deuxième truc qui le rend faux c'est que ça ne touche pas à l'exon 3

Expand  

Dans cet item, puisque il y a tk, tout est détruit mais s'il y avait eu NeoR à la place, seul l'exon 2 aurait été "détruit" ?

 

  On 5/27/2020 at 6:57 PM, Metallica said:

Je comprends pas trop ce que tu veux dire, l'item est faux parce que les souris qui ont une activité nulle de la PAH sont les homozygotes, et ces homozygotes ne représentent en moyenne que 25% des souriceaux à chaque portée donc que l'on soit à la naissance ou 24h après la naissance, ce " 50%" sera faux puisque de base on atteint même pas ce 50%

Expand  

Déjà je me suis trompée c'est pour le B que je pose la question

"la mutation créée ne permet plus de synthèse de la FAH" --> chacune de ces souris (homo ou hétérozygotes) présente la mutation et a donc une activité nulle de la FAH non ?

Du coup on ne peut pas dire que la mutation est létale (même si on ajoute "après 24h") puisque seules les homozygotes meurent

 

Merci pour les autres j'ai compris !

Posted
  On 5/27/2020 at 7:17 PM, OxyGenS said:

Il aurait fallu des cellules ES ?

Expand  

 

Ouaip celles de la masse cellulaire interne ;))

 

 

  On 5/27/2020 at 7:17 PM, OxyGenS said:

Dans cet item, puisque il y a tk, tout est détruit mais s'il y avait eu NeoR à la place, seul l'exon 2 aurait été "détruit" ?

Expand  

 

Yup absolument

 

  On 5/27/2020 at 7:17 PM, OxyGenS said:

Déjà je me suis trompée c'est pour le B que je pose la question

"la mutation créée ne permet plus de synthèse de la FAH" --> chacune de ces souris (homo ou hétérozygotes) présente la mutation et a donc une activité nulle de la FAH non ?

Du coup on ne peut pas dire que la mutation est létale (même si on ajoute "après 24h") puisque seules les homozygotes meurent

Expand  

 

Alors non seules les homozygotes n'en synthétisent pas, les hetero si. IL faut comprendre cet item dans le sens ou cette mutation a un potentiel létale pour la souris à l'état embryonnaire (mais il faut qu'elle soit présente sur les deux chromosomes)

 

Posted
  On 5/27/2020 at 7:45 PM, Metallica said:

IL faut comprendre cet item dans le sens ou cette mutation a un potentiel létale pour la souris à l'état embryonnaire (mais il faut qu'elle soit présente sur les deux chromosomes)

Expand  

L'item est faux pcq les homozygotes naissent et ensuite meurent ?

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